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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:采用丙烯酸甲酯(methyl acrylate,MA)小鼠呼吸道靜式吸入染毒,觀察MA對(duì)小鼠行為、體重和臟器系數(shù)以及小鼠肺組織的炎性損傷和脂質(zhì)過氧化損傷情況,結(jié)合病理改變,探討MA對(duì)肺組織的毒性作用機(jī)理,為進(jìn)一步評(píng)價(jià)MA的吸入毒性,保護(hù)MA接觸人群的健康提供科學(xué)依據(jù)。
方法:選擇健康普通級(jí)封閉群昆明種小鼠,采用MA靜式吸入染毒,在確定了小鼠吸入MA具有急性毒性并得出半數(shù)致死濃度(LC50)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究其對(duì)肺
2、組織損傷的亞慢性毒性機(jī)理。(1)急性毒性實(shí)驗(yàn):包括MA小鼠2h半數(shù)致死濃度的測(cè)定和急性肺損傷的研究。采用寇氏法,在參考美國(guó)有害化學(xué)品及其職業(yè)病數(shù)據(jù)庫(kù)(HAZ-MAP)和楊蔭森公布的小鼠半數(shù)致死濃度的基礎(chǔ)上,每組劑量用2只小鼠的死亡情況,摸索出使全部動(dòng)物死亡的最小劑量(Dm)和一個(gè)動(dòng)物也不死亡的最大劑量(Dn),確定組數(shù)、組距及各組劑量,正式進(jìn)行LC50的測(cè)定。染毒結(jié)束持續(xù)觀察14天后摘取小鼠心、肺組織,稱重,計(jì)算心肺指數(shù)和肺濕干比,右肺
3、進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。(2)亞慢性毒性試驗(yàn):探討亞慢性吸入染毒對(duì)小鼠肺肝腦脂質(zhì)過氧化損傷及肺部炎性損傷的影響。健康昆明種小鼠80只,分為2部分。每部分小鼠都隨機(jī)分為4組(每組10只,雌雄各半),1個(gè)對(duì)照組和3個(gè)染毒組,分別以丙烯酸甲酯(MA)280mg/m3(1/40 LC50)、560mg/m3(1/20 LC50)和1120mg/m3(1/10 LC50)進(jìn)行呼吸道靜式吸入染毒,各劑量組小鼠每天染毒2h,持續(xù)30d。染毒過程中每隔7天
4、稱量一次小鼠體重。各染毒組小鼠都于末次染毒結(jié)束后禁食24h,頸椎脫位法處死小鼠,第一部分40只小鼠用于檢測(cè)肺組織中炎性細(xì)胞因子腫瘤壞死因子-a(TNF-a)和白細(xì)胞介素-6(IL-6)的含量,并摘取左肺計(jì)算肺心指數(shù)和肺濕干比,摘取右肺上葉進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。第2部分40只小鼠用來測(cè)定肺、肝、腦組織中超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量和丙二醛(MDA)含量、總抗氧化能力(T-AOC)水平。
結(jié)果:(1
5、)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示:①M(fèi)A吸入具有急性毒性,采用寇氏法測(cè)得MA呼吸道吸入LC50=11205.52 mg/m3。②動(dòng)物行為觀察可見染毒初期為明顯的感官刺激癥狀,染毒進(jìn)行1h以后開始出現(xiàn)豎毛、側(cè)臥、四肢抽搐和強(qiáng)直性痙攣等中樞神經(jīng)毒性癥狀。③吸入高濃度MA可導(dǎo)致臟器的損害,解剖可見肺臟組織水腫、充血、出血和胃腸道脹氣現(xiàn)象,光鏡下觀察可見肺組織炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和細(xì)胞變性壞死。④稱量臟器重量,計(jì)算肺心指數(shù)和肺濕干比,各染毒組與對(duì)照組比較均有顯著
6、性差異(P<0.01)。(2)亞慢性毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示:①M(fèi)A亞慢性吸入表現(xiàn)主要為刺激性毒作用。染毒期間觀察各染毒組小鼠可見閉眼、抓耳、搔鼻等粘膜刺激反應(yīng),隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng),小鼠行為也由躁動(dòng)趨向安靜。②各染毒組小鼠體重增長(zhǎng)從第7天起開始明顯低于對(duì)照組(P<0.05),染毒濃度越高,體重增長(zhǎng)越緩慢。③小鼠大體解剖可見,染毒1120 mg/m3濃度組小鼠普遍出現(xiàn)肺組織紅腫和充血現(xiàn)象。光鏡觀察顯示,MA染毒各組小鼠肺組織均有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、充血
7、,1120 mg/m3組肺組織有水腫出現(xiàn)。④肺心指數(shù)和肺濕干比各染毒組與對(duì)照組比較無顯著性差異(P>0.05)。⑤與對(duì)照組比較,除染毒280 mg/m3組TNF-a含量略有降低外,其余各染毒組TNF-a和IL-6含量都有不同程度的升高(P<0.05)。⑥在280 mg/m3組,肺組織SOD活性、GSH含量和T-AOC水平與對(duì)照組相比都略有升高(P>0.05),其它各濃度組均有降低趨勢(shì),但1120 mg/m3濃度組降低顯著(P<0.05)
8、;MDA含量隨染毒濃度增加而升高,但只有1120 mg/m3濃度組與對(duì)照組比較差異有顯著性(P<0.01)。⑦肝臟和腦組織SOD活力和GSH含量升降趨勢(shì)與肺組織相同,T-AOC水平肝、腦各濃度組隨染毒濃度增加而呈降低趨勢(shì),僅肝臟1120 mg/m3濃度組與對(duì)照組比較差異有顯著性(P<0.05):MDA含量肝、腦組織均升高,1120 mg/m3濃度組與對(duì)照組相比差異有顯著性(P<0.05)。
結(jié)論:MA對(duì)小鼠肺臟可產(chǎn)生明顯
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