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文檔簡介
1、植物病原真菌嚴重危害植物，特別是農(nóng)作物的生長，是造成糧食減產(chǎn)的主要原因之一。真菌細胞壁由于其結(jié)構(gòu)的特殊性而成為抗真菌劑的理想靶標。細胞壁主要成分之一的β-1,3-葡萄糖由β-1,3-葡聚糖合酶催化合成。該酶的氨基酸序列在真菌中高度保守，以該酶為靶標的抑制劑可以達到廣譜的抗真菌效果。酵母中的β-1,3-葡聚糖合酶催化亞基由兩個序列高度相似的FKS1和FKS2基因編碼。當(dāng)FKS1缺失時，酵母細胞對葡聚糖合酶抑制劑高度敏感。本文選用了多藥抗性
2、轉(zhuǎn)運蛋白調(diào)控基因pdr1缺失的酵母菌株，采用PCR介導(dǎo)的一步基因敲除法，成功敲除了酵母中的FKS1基因，構(gòu)建了以葡聚糖合酶為靶標的酵母細胞篩選模型，通過對比兩種酵母對抑制劑敏感性的差異，初步確定抑制劑的靶向性。實驗建立了雙層平板混合培養(yǎng)法和分組發(fā)酵法，高效篩選土壤中可產(chǎn)該酶抑制劑的微生物。篩選獲得有抗真菌活性的菌株173株，其中菌株ZJA-65的代謝產(chǎn)物對兩種酵母的抑制效果有顯著的差異。 本文還研究了影響范圍十分廣泛的植物病原真
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