第一部分：硫化氫對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)作用;第二部分：硫化氫對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧-復(fù)氧損傷的保護(hù)作用.pdf

1、研究一硫化氫對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧損傷的保護(hù)作用 背景： 新型氣體信號分子一硫化氫(H2S)在心血管系統(tǒng)主要具有舒張血管，開放心肌細(xì)胞ATP敏感鉀通道、抑制L型鈣通道而產(chǎn)生的負(fù)性心肌收縮力的效應(yīng)。外源性H2S在器官水平已被證明可能是缺血缺氧心臟的強(qiáng)效保護(hù)劑，為臨床治療缺血性心臟病提供一個(gè)新的思路。 目的： 本實(shí)驗(yàn)主要研究不同濃度的硫化氫對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧損傷的直接影響，探討其對缺氧心肌細(xì)胞有效的保護(hù)濃度。

2、 方法： 原代培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)分為正常對照組(C組)和缺氧處理組。在缺氧處理組又根據(jù)培養(yǎng)液中NaHS的終濃度分為0μmol/L(S0組)、100μmol/L(S100組)、200μmol/L(S200組)、400μmol/L(S400組)和800μmol/L(S800組)5個(gè)組。缺氧48 h后各組均檢測：細(xì)胞存活數(shù)量、培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性。 結(jié)果： 與S0組比較，S100組、S200組、S4

3、00組缺氧后心肌細(xì)胞存活數(shù)量均升高(P<0.01)，培養(yǎng)液中LDH活性均降低(P<0.05)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。S800組較S0組缺氧后心肌細(xì)胞存活數(shù)量和培養(yǎng)液中LDH活性的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論： 100μmol/L—400μmol/L NaHS對缺氧心肌細(xì)胞具有較好的保護(hù)效果，而高濃度800μmol/L NaHS對缺氧心肌細(xì)胞已不具有保護(hù)作用。 研究二硫化氫對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的保

4、護(hù)作用 背景： 離體心臟的保存移植實(shí)際是一個(gè)冷缺血/再灌注的病理生理過程，影響著移植手術(shù)的成敗。新型氣體信號分子一硫化氫(H2S)可通過預(yù)適應(yīng)或后適應(yīng)啟動(dòng)心肌內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制緩解心肌的缺血/再灌注損傷，是一種有前景的心臟保存液添加劑。 目的： 研究不同濃度的硫化氫(H2S)對缺氧不同時(shí)間的乳鼠心肌細(xì)胞損傷的直接影響及其對復(fù)氧損傷的間接影響，分析其對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧—復(fù)氧損傷的保護(hù)作用。 方法：

5、 原代培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)隨機(jī)分為正常對照組和缺氧處理組及缺氧/復(fù)氧處理組。正常對照組分為與缺氧處理組正常對照的C1組和與缺氧/復(fù)氧處理組正常對照的C2組。缺氧處理組又根據(jù)缺氧液中NaHS的終濃度分為0μmol/L(H0組)、100μmol/L(H100組)、200μmol/L(H200組)和400μmol/L(H400組)的4個(gè)組。缺氧/復(fù)氧處理組亦根據(jù)缺氧液中NaHS的終濃度分為0μmol/L(R0組)、100μmol/L(R1

6、00組)、200μmol/L(R200組)和400μmol/L(R400組)的4個(gè)組。在缺氧24 h、48 h、72 h后及復(fù)氧2h后均檢測：細(xì)胞存活數(shù)量、培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)活性。 結(jié)果： H100組、H200組、H400組缺氧培養(yǎng)24 h、48 h和72 h后與各自時(shí)間點(diǎn)H0組比心肌細(xì)胞存活數(shù)量升高(P<0.01)、培養(yǎng)液中LDH活性降低(P<0.01)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；H200組和H400組在缺氧培養(yǎng)

7、24 h后較缺H100組心肌細(xì)胞存活數(shù)量升高(P<0.05～0.01)、培養(yǎng)液中LDH活性降低(P<0.05～0.01)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。R100組、R200組、R400組缺氧培養(yǎng)24 h、48 h、72 h并復(fù)氧2h后較各自時(shí)間點(diǎn)缺氧/復(fù)氧RO組比缺氧/復(fù)氧心肌細(xì)胞存活數(shù)量升高(P<0.01)、復(fù)氧后心肌細(xì)胞LDH漏出量降低(P<0.01)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論： 100μmol/L～400μmol/L Na