丹參酮ⅡA對新生大鼠腦室周圍白質(zhì)軟化組織中IL-1β及IL-6表達的影響.pdf

1、　　目的：本實驗通過研究丹參酮ⅡA 對新生大鼠腦室周圍白質(zhì)軟化組織中白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)水平的調(diào)節(jié)作用,以明確丹參酮ⅡA治療腦室周圍白質(zhì)軟化癥的作用機制,進一步探尋有效改善PVL的藥物,揭示活血化瘀中藥改善腦白質(zhì)軟化組織中炎癥介質(zhì)的表達,探明活血化瘀中藥改善PVL的相關(guān)作用機制并提供理論依據(jù)。
　　方法：隨機取10只2日齡新生大鼠做為假手術(shù)組。假手術(shù)組游離雙側(cè)頸總動脈,不予結(jié)扎和缺氧,以消除

2、手術(shù)應(yīng)激影響。將其余93只2日齡新生大鼠在乙醚深度麻醉下,取仰臥位姿勢,于頸部正中切開,分離并結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈,手術(shù)時間不超過15分鐘,術(shù)后將各組新生大鼠送入缺氧箱中,箱溫為 37℃,濕度(70 ±5)%,純氮氣輸入,同時用氧氣濃度檢測儀檢測,控制氧氣濃度為 8%,混合氣體的輸入流量為1~2.5ml/min,缺氧0.5h。術(shù)后動物出現(xiàn)頻繁點頭狀抽搐、紫紺、皮膚蒼白、循環(huán)差等為手術(shù)成功標(biāo)志。將造模成功新生大鼠隨機分為模型對照組、丹參酮ⅡA

3、低劑量組及丹參酮ⅡA高劑量組,每組各10只。術(shù)后將新生大鼠返回母鼠身邊繼續(xù)喂養(yǎng)。造模完成 2天后,丹參酮ⅡA低劑量治療組和高劑量治療組分別給予丹參酮ⅡA 7.5mg/kg 和 15mg/kg 腹腔注射,每日 1 次(每日 10：00AM左右進行),連續(xù)給藥3天。假手術(shù)組和模型對照組給予等量生理鹽水腹腔注射。第3日給藥后1h,在乙醚深度麻醉下,快速斷頭取出腦組織,進行 HE染色；并快速取一側(cè)大腦皮層,制成腦組織勻漿,離心取上清液,用酶聯(lián)免

4、疫吸附 (ELISA)法測定IL-1β和IL-6含量。計數(shù)資料應(yīng)用單因素方差分析進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：(1)病理學(xué)組織觀察：假手術(shù)組側(cè)腦室周圍白質(zhì)細胞排列有序,細胞層次尚清楚,細胞質(zhì)、細胞器及細胞核形態(tài)正常,結(jié)構(gòu)完整。模型對照組可見凝固性壞死,大量細胞凋亡；正常組織結(jié)構(gòu)模糊,壞死疏松,神經(jīng)纖維排列不整齊,間質(zhì)水腫,有炎性細胞浸潤；側(cè)腦室旁細胞排列紊亂,白質(zhì)稀疏,呈篩網(wǎng)狀壞死,細胞核固縮深染。丹參酮ⅡA不同劑量治療組腦組織病

5、變較模型對照組明顯減輕,壞死范圍縮小,細胞結(jié)構(gòu)較完整,細胞核固縮小,細胞間質(zhì)水腫輕。高劑量組與低劑量組之間相比,缺血改變更輕。
　　(2)ELISA結(jié)果：模型對照組IL-1β及IL-6的表達與正常組差異顯著,P<0.01。丹參酮ⅡA低劑量組 IL-1β與IL-6的表達與模型對照組差異顯著,P<0.05。丹參酮ⅡA 高劑量組 IL-1β 的表達與模型對照組有極顯著差異, P<0.01；IL-6 的表達與模型對照組差異顯著,P<0.