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文檔簡介
1、目的:通過腦室周圍白質(zhì)軟化動物模型檢測腦室周圍白質(zhì)髓鞘堿性蛋白(Myelin basic protein,MBP)和神經(jīng)膠質(zhì)抗原(Neuron-glial antigen2,NG2)表達(dá),結(jié)合腦組織病理改變和神經(jīng)行為學(xué)測定,初步探討apelin-36對新生鼠PVL是否具有神經(jīng)保護(hù)作用。
方法:選擇3日齡新生SD大鼠分離結(jié)扎左側(cè)頸總動脈并吸入92%N2+8%O2低氧混合氣體制作新生鼠腦室周圍白質(zhì)軟化(PVL)模型,并隨機(jī)分為PV
2、L模型組和apelin干預(yù)組,另設(shè)假手術(shù)組。各組均于生后7天、14天、21天取腦組織HE染色觀察病理改變,免疫組化方法測定腦室周圍白質(zhì)髓鞘堿性蛋白(MBP)以及神經(jīng)膠質(zhì)抗原2(NG2)表達(dá);生后30天行Morris水迷宮測定三組新生鼠學(xué)習(xí)記憶功能,探討apelin-36對新生鼠腦室周圍白質(zhì)損傷模型動物的神經(jīng)保護(hù)作用。
結(jié)果:
1、病理切片HE染色
病變主要發(fā)生在腦室周圍白質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)、內(nèi)囊、胼胝體、外囊區(qū)等
3、,皮質(zhì)區(qū)可見輕微損傷;apelin干預(yù)組和PVL模型組生后7天海馬區(qū)細(xì)胞水腫、排列紊亂、壞死,腦室周圍白質(zhì)疏松、水腫,腦組織可見篩孔樣結(jié)構(gòu)及軟化灶形成、液化壞死;生后14天可見左側(cè)側(cè)腦室擴(kuò)大,腦室周圍篩孔樣結(jié)構(gòu)減少,白質(zhì)軟化及液化壞死病變明顯減輕,小膠質(zhì)細(xì)胞和膠質(zhì)纖維增生;生后21天 PVL模型組及apelin治療組仍可見小膠質(zhì)細(xì)胞增生、膠質(zhì)瘢痕形成;軟化灶及液化壞死較前減輕,但仍有軟化及不規(guī)則結(jié)構(gòu);apelin干預(yù)組腦組織病理損害較P
4、VL模型組病理損傷明顯減輕,而假手術(shù)組在生后7天、14天、21天均未見到明顯病理改變。
2、免疫組織化學(xué)染色
2.1三組新生SD大鼠腦室周圍白質(zhì)MBP表達(dá)生后7天、14天、21天三組大鼠腦室周圍白質(zhì)區(qū)MBP表達(dá)隨日齡增加均呈上升趨勢;同一時間點(diǎn)MBP表達(dá)則是假手術(shù)組最多,apelin治療組次之,模型組表達(dá)最少,經(jīng)方差分析(P<0.05);各組間兩兩比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
2.2三組新生S
5、D大鼠腦室周圍白質(zhì)NG2表達(dá)生后7天、14天、21天三組大鼠腦室周圍白質(zhì)區(qū) NG2表達(dá)隨日齡增加均呈下降趨勢,同一時間點(diǎn) NG2表達(dá)則假手術(shù)組最少,apelin干預(yù)組次之,PVL模型組表達(dá)最多,經(jīng)方差分析(P<0.05);各組間兩兩比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
3、在生后30天Morris水迷宮行為學(xué)測試
逃避潛伏期假手術(shù)組逃避潛伏期最短,apelin干預(yù)組次之,PVL模型組逃避潛伏期最長,經(jīng)方差分析(
6、P<0.05),三組間兩兩比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);穿環(huán)指數(shù)假手術(shù)組穿環(huán)次數(shù)最多,apelin干預(yù)組居中,PVL模型組最少,經(jīng)方差分析(P<0.05),三組間兩兩比較,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1、腦組織病理檢測符合早產(chǎn)兒腦室周圍白質(zhì)軟化病理改變,提示新生鼠腦室周圍白質(zhì)軟化動物模型制作成功。
2、Apelin-36能減輕新生鼠腦室周圍白質(zhì)軟化模型動物腦白質(zhì)疏松、水腫,減輕白
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