2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、由于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal Stromal Cells,MSCs)具有多向分化潛能,而且易于獲得,所以近年來(lái)隨著基因工程興起,不少學(xué)者把骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為基因治療靶細(xì)胞,治療某些難治疾病,比如骨缺損、椎間盤(pán)退行性疾病、心力衰竭等等,而這些疾病的患病人群多為老年患者,可能跟衰老機(jī)體中的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化發(fā)生一定改變有關(guān),因此,探討間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性,以及其功能隨著年齡增長(zhǎng)是否發(fā)生改變尤為重要。本次實(shí)驗(yàn)通

2、過(guò)對(duì)不同年齡層SD大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性進(jìn)行比較分析,探討年齡對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞的影響。
  目的:
  研究不同年齡SD大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性,并探討不同年齡SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響。
  方法:
  分別取幼年(21天)、中年(3個(gè)月)、老年(14個(gè)月)的SD大鼠,取四肢骨髓,采用沖骨髓細(xì)胞貼壁培養(yǎng)法,用含10%體積分?jǐn)?shù)胎牛血清(FCS)的低糖DMEM(L-DMEM)培養(yǎng)基

3、,貼壁、傳代、培養(yǎng)、純化出MSC,使其在體外擴(kuò)增生長(zhǎng),在倒置顯微鏡下觀察生長(zhǎng)特性,瑞氏染色觀察細(xì)胞形態(tài)。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面抗原。分別取每個(gè)年齡階段細(xì)胞的第3代、第6代、第9代、第12代和第15代做MTT,繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn),比較細(xì)胞的增殖能力。取每個(gè)年齡層的第3代的MSCs做成骨誘導(dǎo)分化和成脂肪誘導(dǎo)分化,觀察年齡差異對(duì)其成成骨細(xì)胞的能力和成脂肪細(xì)胞的能力的影響。通過(guò)茜素紅半定量法比較鈣鹽沉積情況。通過(guò)油紅O定量法比較3個(gè)年齡層SD鼠MSC

4、s的成脂能力。通過(guò)檢測(cè)ALP的值,來(lái)比較年齡對(duì)MSCs成骨能力的影響。
  結(jié)果:
  (1)經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)鑒定出細(xì)胞表面抗原95.27±0.52 CD29,CD44為陽(yáng)性,4.06±0.29 CD34,CD45為陰性,證明通過(guò)沖骨髓細(xì)胞貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)出的細(xì)胞為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
  (2)倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),幼年組,中年組,老年組的SD大鼠的MSC的原代都是呈集落樣生長(zhǎng),并且其中有許多雜細(xì)胞,經(jīng)過(guò)一次胰酶消化傳代

5、后,細(xì)胞均呈梭形,不再有集落產(chǎn)生,第3,4代,細(xì)胞形態(tài)趨于穩(wěn)定,雜細(xì)胞逐漸減少,各組間沒(méi)有差異。
  (3) MTT結(jié)果顯示,第3、6代的3個(gè)年齡組比較,增殖能力無(wú)顯著差異,但在第9代、第12代和第15代,幼年組的增殖能力顯著高于中年和老年組。
  (4)成脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)和成骨細(xì)胞誘導(dǎo)的結(jié)果顯示,幼年SD大鼠的間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)出的鈣結(jié)節(jié)明顯,且數(shù)目顯著多于中年組和老年組,而中年組多于老年組。誘導(dǎo)出的成脂肪細(xì)胞,脂泡在數(shù)量上幼年

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