騾雞的性別鑒定和性別決定候選因子表達(dá)的研究.pdf

1、騾雞是烏骨雞（♂）與珍珠雞（♀）通過人工授精產(chǎn)生的雜交體，是一個遠(yuǎn)緣雜交體，成年騾雞的性腺發(fā)育不完全，從外形上難以區(qū)分雌雄性別。
　　本文根據(jù)已知禽類CHD基因序列設(shè)計了3條引物，采用特異性PCR擴(kuò)增CHD基因片段，結(jié)果表明，這三條引物對已知性別的成年珍珠雞和烏骨雞檢測結(jié)果正確；對珍珠雞和烏骨雞的雞胚性別進(jìn)行了相應(yīng)的檢測，檢測結(jié)果與剖檢結(jié)果相符，證明本文建立的特異性PCR方法可以用于成年雞和雞胚的性別鑒定。在此基礎(chǔ)上，用此方法鑒定

2、騾雞及其雞胚的性別，檢測結(jié)果表明騾雞雌雄性別比例均衡，這與雄性騾雞占較大比例的報道不一致。
　　通過對成年騾雞的解剖和組織學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)大部分騾雞的腹腔內(nèi)同時存在著卵巢和睪丸，為雌雄兼合體。且其卵巢和睪丸都沒發(fā)育成熟，重量與其親本的性腺相差較大，睪丸中沒有成熟的精子，卵巢中也沒成熟的卵母細(xì)胞，性腺發(fā)育的不成熟是騾雞不能繁殖的根本原因。
　　與哺乳動物不同，鳥類的性染色體組成是ZZ：ZW，目前其性別決定機(jī)制還不完全清楚。是否是Z

3、染色體的劑量效應(yīng)在雞的性別決定中起主要作用現(xiàn)在還待解結(jié)。雞DMRT1基因定位在Z染色體上且與W染色體不同源，Dmrt1在胚胎雄性性腺的表達(dá)要遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過雌性性腺，被認(rèn)為是雞最重要的雄性決定候選基因。論文選取五個鳥類的性別決定候選因子Dmrt1、Sox9、Asw、Fet1和芳香化酶，以騾雞為實(shí)驗(yàn)材料通過RT-PCR檢測這五個因子在性別分化的關(guān)鍵時期（E4.5d-E12.5d）的表達(dá)量，比較騾雞與其親本之間的表達(dá)差異，結(jié)果為ZZ/ZW騾雞的Dm

4、rt1表達(dá)量介于父、母本之間，說明Dmrt1表達(dá)的上調(diào)與騾雞睪丸的形成有關(guān)，而Dmrt1表達(dá)的下降與騾雞卵巢的形成相關(guān)；Sox9在ZZ/ZW騾雞及其父本的睪丸中表達(dá)，但騾雞中的表達(dá)時間有所推遲；另外Asw和Fet1在E4.5檢測到轉(zhuǎn)錄本，芳香化酶出現(xiàn)時間比較遲，Asw在ZW騾雞和母本卵巢中特異表達(dá)，但ZW騾雞的卵巢發(fā)育是不完全的；本文中Fet1的研究結(jié)果與已知不同，F(xiàn)et1并非在雌性中特異表達(dá)，在家雞和ZZ騾雞的睪丸中都檢測到Fet1的