干擾素α對大鼠胰腺纖維化及胰腺組織α-SMA、Ⅲ型膠原表達(dá)的影響.pdf

1、目的： 觀察皮下注射干擾素α(IFN-α)對二乙基二硫代氨基甲酸鹽(DDC)反復(fù)腹腔內(nèi)注射誘導(dǎo)的大鼠胰腺纖維化模型的胰腺組織纖維增生程度的影響，并通過研究胰腺星狀細(xì)胞(PSC)活化標(biāo)志物α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分Ⅲ型膠原的蛋白表達(dá)，探討IFN-α對大鼠胰腺纖維形成的作用及其對纖維化過程中PSC活化、增殖和膠原表達(dá)的影響，并探討其可能的作用機(jī)制。 方法： 雄性Wistar大鼠40只，

2、體重200～250g，隨機(jī)分成三組，對照組10只，模型組和干擾素組各15只，通過連續(xù)6周每周2次腹腔內(nèi)注射DDC誘導(dǎo)大鼠胰腺纖維化模型，對照組大鼠每周2次腹腔內(nèi)注射等量生理鹽水共用6周。干擾素組在造模同時每只每天皮下注射IFN-α10萬U，模型組和對照組每只每日等量生理鹽水皮下注射。6周末三組動物同時取材，胰腺組織10％中性甲醛固定、石蠟包埋，切片經(jīng)常規(guī)H-E染色和膠原特異性染色即Masson三色染色，光鏡下觀察胰腺組織的病理學(xué)變化并對

3、胰腺纖維化程度行病理學(xué)評分。用免疫組化(SABC)法測定胰腺組織中α-SMA和Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)并進(jìn)行計算機(jī)顯微圖像分析。 結(jié)果： 實驗前，三組大鼠的體重?zé)o統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，實驗開始后模型組和干擾素組大鼠體重增長緩慢，一周后即與對照組有顯著性差異(P<0.05)，從第四周開始模型組大鼠體重不升反降，五周后模型組體重即明顯低于干擾素組，二者差異有顯著性(P<0.05)。模型組胰腺組織纖維增生、膠原沉積、腺泡萎縮和

4、空泡變性等纖維化表現(xiàn)明顯，干擾素組上述纖維化表現(xiàn)較輕，且纖維增生主要表現(xiàn)在小葉間，纖維化評分干擾素組亦顯著低于模型組(P<0.05)，對照組胰腺組織僅個別有炎細(xì)胞浸潤或出血，無纖維化表現(xiàn)。免疫組化染色顯示Ⅲ型膠原對照組呈陰性表達(dá)，模型組和干擾素組均呈陽性表達(dá)且主要位于腺泡周圍呈網(wǎng)格狀包繞腺泡，計算機(jī)顯微圖像分析結(jié)果顯示干擾素組Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)量較模型組明顯減少(P<0.05)。α-SMA免疫組化染色顯示對照組僅見于血管及導(dǎo)管壁，而模型組

5、和干擾素組除血管及導(dǎo)管壁外主要見于胰腺小葉間質(zhì)及腺泡旁，顯微圖像分析結(jié)果顯示干擾素組α-SMA蛋白表達(dá)量較模型組明顯減少(P<0.05)。 結(jié)論：本研究結(jié)果顯示，在DDC誘導(dǎo)大鼠胰腺纖維化的同時給予IFN-α每只每目10萬U皮下注射能顯著減輕胰腺纖維化的程度，減少Ⅲ型膠原和α-SMA的蛋白表達(dá)，說明IFN-α對DDC誘導(dǎo)的大鼠胰腺纖維化有一定的預(yù)防作用。而此作用可能是通過抑制PSC活化，減少Ⅲ型膠原等ECM蛋白表達(dá)，并增加基質(zhì)金