TGF-β-,1-及其受體在胰腺纖維化大鼠中表達(dá)的研究.pdf

1、目的；TGF-β1是一種多肽類細(xì)胞生長因子，能刺激間質(zhì)細(xì)胞增生，抑制上皮類細(xì)胞生長，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)形成，抑制免疫功能，參與血管生成等。通過其Ⅰ型受體(TβRI)和Ⅱ型受體(TβRII)以及細(xì)胞內(nèi)的Smad信號(hào)通道蛋白發(fā)揮作用。在肝、腎、肺等器官纖維化中，TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受體的表達(dá)均較正常組織明顯升高。TGF-β1是慢性胰腺炎胰腺纖維化形成過程中很關(guān)鍵的細(xì)胞因子，這一觀點(diǎn)已經(jīng)被廣泛認(rèn)可。但是，在此過程中，其Ⅰ、Ⅱ型受體的表達(dá)有何變

2、化國內(nèi)外研究尚少。本研究利用雄性Wistar大鼠建立胰腺纖維化的動(dòng)物模型，通過觀察TGF-β1及其受體在大鼠胰腺纖維化形成過程中的變化來推測(cè)它們?cè)谝认倮w維化中的作用，從而進(jìn)一步探討慢性胰腺炎的發(fā)病機(jī)制。 方法；健康雄性Wistar大鼠48只，體重220～240g，將其隨機(jī)分為2組：對(duì)照組和模型組，每組24只。然后對(duì)2組大鼠分別進(jìn)行如下處理：模型組：每周2次腹腔內(nèi)注射二乙基二硫代氨基甲酸鈉(DDC)750mg/kg；對(duì)照組：每周2

3、次腹腔內(nèi)注射生理鹽水7.5ml/kg。從第一周開始，每周處死各組大鼠的4只，取胰腺組織和肝、腎組織。將一部分胰腺組織用10％福爾馬林溶液固定，石蠟包埋，HE染色，然后由病理科醫(yī)生顯微鏡下觀察，進(jìn)行組織學(xué)觀察評(píng)分。胰腺組織中腺細(xì)胞萎縮、小葉內(nèi)或小葉間纖維化以及炎癥細(xì)胞浸潤等病理改變的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如下：0分：無上述病理改變；1分：上述損傷輕微且局限于小葉內(nèi)(不超過50％)；2分：小葉內(nèi)有較廣泛的上述損傷(超過50％)；3分：上述損傷廣泛的存在于

4、小葉間和小葉內(nèi)，或有小葉結(jié)構(gòu)破壞。低倍鏡下從每張切片中任選3個(gè)視野進(jìn)行評(píng)分，3次分?jǐn)?shù)之和即為該切片的組織學(xué)得分。另一部分胰腺組織保存在-80℃冰箱里，留待行RT-PCR檢測(cè)。將肝、腎組織用福爾馬林溶液固定、石蠟包埋、行HE染色，顯微鏡下觀察有無病理改變。實(shí)驗(yàn)時(shí)間共6周。所有大鼠均喂以普通顆粒飼料，自由飲水。所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±SD)表示，采用SPSS11.0軟件處理。樣本間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，變量間的關(guān)系采用直線相關(guān)分析

5、。P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果；①前3周模型組大鼠較之對(duì)照組大鼠體重增長緩慢，但是兩組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；從第4周開始模型組大鼠體重開始下降，與對(duì)照組相比體重有顯著差異；②從第二周開始，模型組大鼠胰腺組織開始出現(xiàn)纖維化，且隨時(shí)間延長纖維化程度加重，纖維化程度評(píng)分與對(duì)照組相比有顯著差異；③模型組大鼠胰腺組織表達(dá)TGF-β1、TβRI和TβRII在各個(gè)時(shí)期均高于對(duì)照組，兩者比較有顯著差異；④模型組大鼠胰腺組織所表達(dá)的TGF-β