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文檔簡介
1、目的:以大鼠哮喘模型為研究對象,通過干擾素-γ( Interferon-γ,IFN-γ)對哮喘大鼠的干預(yù),研究炎癥因子干擾素-γ是否參與調(diào)節(jié)哮喘大鼠肺組織半胱氨酰白三烯受體1(cysteinyl leukotriene receptor1, CysLTR1)的表達(dá),研究不同的給藥方式和不同劑量是否對 CysLT1的表達(dá)有不同影響,從而更多了解哮喘發(fā)病機(jī)制為其臨床帶來更多診治指導(dǎo)。
方法:將48只健康SD雄性大鼠,隨機(jī)分為六組:
2、正常對照組(N組)、哮喘模型組(A組)、哮喘鼠腹腔注射低劑量IFN-γ干預(yù)組(L1組)及腹腔注射高劑量IFN-γ干預(yù)組(H1組),哮喘鼠霧化吸入低劑量IFN-γ干預(yù)組(L2組)及霧化吸入高劑量干預(yù)組(H2組),制作模型后,注射給藥組L1、H1組分別腹腔注射含IFN-γ5萬U、10萬U的滅菌注射用水1ml·kg-1;吸入給藥組 L2、H2組分別霧化含 IFN-γ5萬 U、10萬 U的滅菌注射用水1mlkg-1,。在末次激發(fā)后,測定大鼠氣道
3、壓力,并采用免疫組織化學(xué)法(IHC)、逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法和蛋白免疫印跡法(WB)檢測IFN-γ干預(yù)前后各組大鼠肺組織CysLTR1的表達(dá)情況。
結(jié)果:(1)N組、A組、L1組、H1組、L2組及H2組在吸入組胺濃度為10mg/l時(shí),各組氣道壓力分別為(2.100±0.244)Kp、(3.21±0.348)Kp、(3.84±0.502)Kp、(3.84±0.444)Kp、(3.766±0.374)Kp及(4.7
4、77±0.535)Kp,L1組、H1組和L2組的差異沒有顯著性,其余任意兩組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);當(dāng)吸入組胺濃度為20mg/l時(shí),各組氣道壓力分別為(2.500±0.430)Kp、(3.622±0.426)Kp、(4.2±0.426) Kp、(4.133±0.353)Kp(4.066±0.291)Kp及(5.222±0.491)Kp,L1組、H1組和L2組的差異沒有顯著性,任意兩組間氣道壓力差異的比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
5、<0.05)。(2)IHC法檢測N組、A組、L1組、H1組、L2組及H2組的CysLTR1陽性細(xì)胞表達(dá)計(jì)數(shù)分別為11.889±2.369、19.333±3.240、26.222±5.585、26.888±6.988、26.000±5.522及33.222±4.493;L1組、H1組和L2組的差異沒有顯著性,其余任意兩組間比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(3)RT-PCR法檢測各組的CysLTR1mRNA/β-actin相對密度分別
6、為0.218±0.050、0.323±0.084、0.458±0.083、0.488±0.089、0.447±0.083、0.670±0.108;L1組、H1組和L2組的差異沒有顯著性,其余任意2組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。(4)WB法檢測各組的CysLTR1蛋白相對密度分別為0.797±0.083、1.410±0.107、2.333±0.234、2.448±0.099、2.641±0.058、5.063±1.394;L1
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