補腎解毒通絡(luò)方對EAE大鼠的防治作用和對干擾素-γ影響的研究.pdf

1、目的：觀察補腎解毒通絡(luò)方對Wistar大鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)的臨床表現(xiàn)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理學改變及干擾素-γ在發(fā)病過程中的影響，探討MS的防治和治療機制，為開發(fā)多發(fā)性硬化癥新的治療途徑提供有意義的基礎(chǔ)實驗依據(jù)。
　　方法：
　?。?）取健康雌性Wistar大鼠75只，隨機分為：空白組、模型組、中藥治療組，中藥治療組又按劑量不同分為低劑量治療組、中劑量治療組、高劑量治療組，每組15只?？瞻捉M不做任何處理；模型組造

2、模后開始每天給與生理鹽水0.2ml灌胃；中藥組免疫當天開始給藥，高劑量組每天按每公斤體重60g生藥量給予中藥2ml灌胃，中劑量組每天按每公斤體重30g生藥量給予1ml灌胃，低劑量組每天按每公斤體重15g生藥量給予0.5ml灌胃，以上灌胃方法均灌胃至實驗終止。
　　（2）EAE模型建立：采用豚鼠脊髓勻漿和完全福式佐劑（CFA）制成的混合液作為抗原，同時皮內(nèi)注射百日咳疫苗。對除空白組以外，每日觀察造模后各組動物的臨床表現(xiàn)，測量體重變化

3、，并給予神經(jīng)功能的評分。
　?。?）樣本采集：分別于免疫后第14天和第21天，采用眼眶后靜脈叢采血法采取靜脈血，心臟灌流后取腦、脊髓置于4％多聚甲醛中固定，石蠟包埋、切片。
　?。?）蘇木素-伊紅（HE）法染色觀察腦、脊髓病理改變；ELISA法測定血清內(nèi)干擾素-γ含量。
　　結(jié)果：
　?。?）補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組大鼠的發(fā)病率與EAE組相比明顯減低；補腎解毒通絡(luò)方高、中、低組大鼠的平均潛伏期較EAE組明顯延長

4、；補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組大鼠發(fā)病高峰期、發(fā)病緩解期的神經(jīng)功能評分明顯低于EAE組；補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組大鼠發(fā)病高峰期、發(fā)病緩解期的體重明顯高于EAE組和中藥低劑量組。
　　（2）發(fā)病高峰期補腎解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組大鼠CNS中炎性病灶數(shù)與EAE組相比顯著減少，且中藥的高、中劑量組病灶數(shù)低于低劑量組，發(fā)病緩解期補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組大鼠CNS中炎性病灶數(shù)與EAE組相比顯著減少，低劑量組與EAE組相比無明顯差異。

5、r>　　（3）補腎解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組發(fā)病高峰期血清干擾素-γ含量較EAE組顯著降低；補腎解毒通絡(luò)方高、中劑量組發(fā)病緩解期血清干擾素-γ含量較EAE組顯著降低，低劑量組顯著高于高劑量組，高、中劑量組無顯著差異。
　　結(jié)論：
　?。?）補腎解毒通絡(luò)方預防性治療可以明顯降低急性EAE大鼠的發(fā)病率、緩解臨床癥狀、抑制體重下降、縮短病程。
　?。?）補腎解毒通絡(luò)方預防性治療能減輕發(fā)病時神經(jīng)功能損傷的程度，減輕 EAE大鼠