慢性腎臟病患者血清和尿透明質(zhì)酸、Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原及層粘連蛋白的變化及其臨床意義.pdf

1、一.研究目的腎纖維化(renalfibrosis)是多種慢性腎病的共同病理基礎(chǔ)與慢性腎病向終末期腎衰竭進展的重要過程。發(fā)生在腎間質(zhì)和腎小球等部位，分別表現(xiàn)為腎間質(zhì)纖維化(renalinterstitialfibrosis)與腎小球硬化(gromeruloselerosis)，主要特征為腎小球內(nèi)系膜細胞增生，細胞外基質(zhì)(Extracellulormatrix，ECM)顯著增寬；腎小管和間質(zhì)毛細血管的喪失及細胞外基質(zhì)的過度積聚。腎小管間質(zhì)病

2、變較腎小球病變與腎功能損傷和預(yù)后關(guān)系更為密切. 細胞外基質(zhì)(ECM)位于細胞的周圍，主要由膠原蛋白、糖蛋白及蛋白多糖三大類物質(zhì)聚合組成，對細胞的生理功能起著非常重要的作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，腎小球內(nèi)ECM的大量積聚是腎小球硬化的重要病理基礎(chǔ)，因此，深入研究ECM對防治腎小球硬化可能有重要的意義。腎小球ECM包括兩部分，即腎小球基膜及系膜基質(zhì)，其主要成分均包括膠原、蛋白多糖及糖蛋白。在正常情況下，細胞外基質(zhì)(ECM)的合成和降解基

3、本平衡，處于一種動態(tài)平衡中，而不會引起腎小球的病理改變，該過程失衡會導(dǎo)致腎小球組織結(jié)構(gòu)的破壞。腎小球在病理狀態(tài)下經(jīng)歷一個由系膜細胞增生→ECM積聚→節(jié)段硬化→球性硬化的病理過程。腎小球系膜區(qū)ECM的積聚越多，腎小球硬化越明顯。腎小球ECM中膠原的含量達50％以上，Ⅳ型膠原(TypeⅣCollagen，C-Ⅳ)是腎基底膜最主要的膠原組成成分，它能反映腎基底膜膠原蛋白的代謝狀態(tài)。層粘連蛋白(Laminin，LN)是腎ECM大分子非膠原糖蛋白

4、，由基底膜的上皮細胞和內(nèi)皮細胞合成，是構(gòu)成基底膜的一種主要成分，與C-Ⅳ的分布相同，與C-Ⅳ結(jié)合形成基底膜的骨架，透明質(zhì)酸(HyalaronicAcid，HA)是一種蛋白多糖成分，是構(gòu)成腎基質(zhì)的主要成分之一。Ⅲ型前膠原(ProcollagenTypeⅢ，PCⅢ)是一種纖維膠原，在間質(zhì)中大量分布，間質(zhì)膠原大量增生，也是導(dǎo)致腎結(jié)構(gòu)的改變，引起腎硬化、纖維化的重要因素。慢性腎功能衰竭是由于各種致病因子作用于機體導(dǎo)致了大量ECM積聚，從而造成腎

5、小球硬化和間質(zhì)纖維化，進而失去各種功能。目前，尚無檢測腎纖維化的血清學(xué)指標(biāo)，臨床上一般依賴有創(chuàng)傷性的經(jīng)皮腎穿刺活檢病理診斷，然而有難以隨訪和動態(tài)觀察的不足，且部分患者不易接受，及時常受到身體條件的限制如血壓控制不佳、出血傾向、腎臟存在感染等因素。慢性腎臟病進展到終末期腎病是一個逐漸進展的過程，臨床表現(xiàn)隱匿，用血肌酐評估腎功能缺乏足夠的敏感性，失去了早期干預(yù)的時機。早期干預(yù)腎纖維化，可延緩或逆轉(zhuǎn)慢性腎臟病的進展，最大程度的減少和延緩終末期

6、腎病及其并發(fā)癥的發(fā)生。越早干預(yù)，效果越好，干預(yù)越晚，腎纖維化后出現(xiàn)高壓力、高灌注、高濾過，血流動力學(xué)改變，炎癥因子更活躍，后期是一加速過程，難于實施干預(yù)治療。更早期發(fā)現(xiàn)腎纖維化，可望早期應(yīng)用干預(yù)腎纖維化藥物，延緩、中止腎纖維化進程。 本研究的主要目的：探討慢性腎臟病患者血清和尿透明質(zhì)酸(HA)、Ⅲ型前膠原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型膠原(C-Ⅳ)、層粘連蛋白(LN)的變化與腎功能的關(guān)系，其在慢性腎損害發(fā)生發(fā)展中的作用和早期診斷的意義。

7、 二.對象和方法㈠研究對象90例患者全部選自2004年1月-2005年3月在廣州市第二人民醫(yī)院的住院患者，入院后均已確診慢性腎臟病。 ㈡方法：1.將患慢性腎臟疾病而腎功能正常的病人、慢性腎衰竭氮質(zhì)血癥的病人、尿毒癥病人及正常健康體檢者分組。 (1)患慢性腎臟病并腎功能正常組(A組)：30例，肌酐清除率(Ccr)均高于80ml/min。 (2)慢性腎衰竭氮質(zhì)血癥組(B組)：30例，肌酐清除率(Ccr)25～50

8、ml/min。 (3)慢性腎衰竭尿毒癥組(C組)：30例，肌酐清除率(Ccr)低于10ml/min。 (4)(D組)：另選擇26例無腎病健康體檢者，作為本研究的正常對照組。 各組別均肝功能正常，除外骨髓纖維化，腫瘤，泌尿系統(tǒng)、肺部感染，心肌纖維化及肺間質(zhì)纖維化。慢性腎衰竭診斷按內(nèi)科學(xué)第6版中的慢性腎衰竭診斷及分期標(biāo)準(zhǔn)。 2.所有患者及正常對照組均于空腹采集靜脈血2ml，取血清。留取同日過夜中段晨尿與血清一

9、起低溫冰凍保存送檢。 3.血、尿HA、C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ均采用放射免疫分析法測定，并測血肌酐(Creatinine，Cr)，24小時尿蛋白定量。 (三)統(tǒng)計學(xué)處理：計數(shù)資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較用方差分析。做血HA、C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ與血Cr水平的直線性相關(guān)分析，尿HA、C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ與尿蛋白定量的直線性相關(guān)分析，尿HA、C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ與血Cr水平的直線性相關(guān)分析。 三.結(jié)

10、果(一)血清HA水平：C組＞B組＞A組＞D組，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 ㈡血清PCⅢ水平：A組與D組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，B組、C組與D組組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，B、C組組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，C組＞B組＞A組。 ㈢血清C-Ⅳ水平：A組與D組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，B組、C組與D組組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，B、C組組間差異有統(tǒng)計學(xué)

11、意義(P＜0.0D，C組＞B組＞A組。 ㈣血清LN水平：A組與D組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，B組、C組與D組組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，B、C組組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，C組＞B組＞A組。 ㈤相關(guān)分析表明，B、C組血清HA、PCⅢ、C-Ⅳ、LN水平分別與血Cr水平呈正相關(guān)，A組因血肌酐穩(wěn)定因此未做相關(guān)分析。 ㈥尿液C-Ⅳ水平：C組＞B組＞A組＞D組，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P

12、＜0.01)。㈦尿液LN水平：C組＞B組＞A組＞D組，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。 ㈧尿液HA水平：A組＞B組＞C組，B組、C組與D組組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，B、C組組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)，A組與D組組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。 ㈨尿液PCⅢ水平：C組＞B組＞A組＞D組，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)㈩相關(guān)分析表明：A、B、C組尿液HA、PCⅢ、C-Ⅳ、LN

13、水平分別與尿蛋白定量無相關(guān)性(P＞0.05)，B、C組尿液C-Ⅳ、LN水平分別與血Cr水平呈正相關(guān)(P＜0.05)，B、C組尿HA分別與血Cr水平呈負相關(guān)(P＜0.01)，B、C組尿液PCⅢ與血Cr水平無相關(guān)性(P＞0.05)。 四.結(jié)論血清、尿液HA、C-Ⅳ、LN及PC-Ⅲ的變化可反映ECM的變化，在腎功能不全的不同發(fā)展階段，它們出現(xiàn)不同程度的變化。本研究的初步結(jié)果顯示其可作為臨床判斷腎纖維化發(fā)生與發(fā)展的間接參考指標(biāo)，為慢性腎