早期類風濕性關節(jié)炎寒熱證候基因組信息學研究初探.pdf

1、Y9358醚j密級l——分類號——單位代碼墨i絲學號呈璺她嫂嫂嬰中國中醫(yī)科學院Z003級碩士研究生學位論文早期類風濕性關節(jié)炎寒熱證候基因組信息學研究初探申請人：呂誠專業(yè)：中西醫(yī)結合基礎研究方向：痹證(類風濕性關節(jié)炎)發(fā)生機理的研究導師：呂愛平研究員中國中醫(yī)科學院基礎理論班究所2006年5月北京中國中醫(yī)科學院碩士畢業(yè)論文中文摘要中文摘要目的分離純化類風濕性關節(jié)炎(RA)不同證型患者及正常人外周血CD4T淋巴細胞，提取細胞總RNA，利用高通

2、量的全基因組芯片對其進行檢測，探索RA患者寒熱證候之間、RA患者與正常對照之間差異基因表達的微觀基礎。研究對象和方法研究思路：隨機選取符合納入標準的RA女性患者33例，參照相應標準進行寒、熱證候辨別。取患者晨起空腹靜脈血，利用淋巴細胞分離液，分離純化CD4T淋巴細胞，提取細胞的總RNA，與全基因組芯片進行雜交并檢測。檢測結果采用t檢驗、方差分析等方法作統(tǒng)計分析，找出寒熱證候之間、正常人與患者之間差異表達的基因，并對篩選出的差異基因作聚類

3、分析，對結果作實時PCR檢測驗證。1研究對象11病例收集2004年1月至2005年1月，隨機選取項目合作單位(中國中醫(yī)科學院西苑醫(yī)院、北京中日友好醫(yī)院)門診及風濕科住院女性患者33例，年齡20～60歲。納入病例中寒證患者為21例，熱證患者為12例。正常對照組取自同期中國中醫(yī)科學院西苑醫(yī)院門診體檢女性，計12例，年齡20～40歲，正常對照組依據體檢結果排除了感染、炎癥等影響因素。12病例納入標準疾病診斷、病情進展分類標準：參照1987年美

4、國風濕病學會(ARA)修訂的診斷標準擬定。證候診斷標準：參照1993年衛(wèi)生部《中藥新藥治療痹病的臨床研究指導原則》、1994年國家中醫(yī)藥管理局發(fā)布的《中醫(yī)病證診斷療效標準旭痹的診斷依據、證候分類、療效評定》、1997年中華人民共和國國家標準《中醫(yī)l臨床診療術語證候部分》和1988年全國中西醫(yī)結合風濕類疾病學術會議擬訂的診斷標準。寒、熱證候診斷標準：寒證：①關節(jié)冷痛重著，屈伸不利；②關節(jié)拘急，局部畏寒，皮色不紅；③舌胖，質淡，苔白；脈弦緊