兔骨髓基質(zhì)細胞附著于自體牙骨質(zhì)片生長的體外研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文兔骨髓基質(zhì)細胞附著于自體牙骨質(zhì)片生長的體外研究姓名：陳明申請學位級別：碩士專業(yè)：牙周病學指導教師：劉宏偉20040615中文摘要由于牙周組織再生細胞的數(shù)量和來源不足，牙骨質(zhì)很難得到再生。牙骨質(zhì)與骨組織在結(jié)構(gòu)、性質(zhì)上有諸多相似之處，同時骨髓基質(zhì)細胞(BMSCs)具有向多種組織分化的潛能，且材料易得，易于在體外分離、培養(yǎng)和擴增；可來源于自體，不存在免疫排斥問題，因此將骨髓基質(zhì)細胞作為牙周組織工程，特別是牙骨質(zhì)再生中的

2、種子細胞具有可行性。本研究擬將體外誘導培養(yǎng)的骨髓基質(zhì)細胞作為種子細胞，牙骨質(zhì)片作為載體，觀察其在載體上的粘附生長情況，探討體外以骨髓基質(zhì)細胞為種子細胞修復牙骨質(zhì)的可行性，為進一步研究牙骨質(zhì)的生成修復奠定基礎。方法：1、抽取健康新西蘭大白兔骨髓，體外以全血培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng)，傳代后以含10mmol／LB一甘油磷酸鈉、104mol／L地塞米松、50mg／LL一抗壞血酸的礦化條件培養(yǎng)液培養(yǎng)，每日在光鏡F觀察細胞形態(tài)，制作細胞爬片，進行HE染色

3、，用改良Gomori鈣鈷法進行堿性磷酸酶染色和鈣結(jié)節(jié)染色檢測其成骨活性。2、拔除健康新西蘭大白兔牙，制成3mmX25mmO5mm的牙骨質(zhì)片，取24孔培養(yǎng)板，放入無菌的牙片(實驗組)和玻片(對照組)，將經(jīng)Gomori鈣鈷法染色證明已具成骨細胞表型的第3～4代的骨髓基質(zhì)細胞以1X106個／孑L的細胞密度接種于牙片和玻片的表面，加入礦化培養(yǎng)液培養(yǎng)，每2d換液1次，按分組時間(分為ld、1w、2w、3w、4w等時刷點)取材。3、將實驗組取材的樣