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文檔簡介
1、目的:觀察鏈脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠不同時期血清脂聯(lián)素(ADPN)及其受體T-鈣粘蛋白(T-cad)在心肌組織的表達水平以及心肌細胞結(jié)構(gòu)改變,探討脂聯(lián)素及其受體T-鈣粘蛋白在糖尿病心肌病變發(fā)生、發(fā)展中的變化及作用。 方法:采用成組對照研究。取64只6周齡200g~250g的清潔級雄性Wister大鼠,按完全隨機設(shè)計分為實驗組(一次性腹腔注射1%STZ,50mg/kg,72h后空腹血糖≥16.7mmol/l為成模,n=32)和
2、對照組(腹腔注射同體積枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液,n=32).兩組同時喂養(yǎng),并分別于1、4、8、12周每組隨機抽取8只,空腹心內(nèi)采血、左心室同一部位取心肌。采用酶聯(lián)免疫法(ABC-ELISA)測定血清ADPN及C肽水平,心肌組織T-cad表達采用免疫組化觀測,同時分別在光鏡、電鏡下觀察心肌細胞結(jié)構(gòu)改變。實驗組、對照組各指標在各時間段之間的比較用獨立樣本t檢驗,總的均數(shù)之間的比較用二因素析因設(shè)計的方差分析,并對實驗組血清ADPN及心肌組織T-
3、cad的表達作直線相關(guān)性分析。 結(jié)果:1.隨著病程的延長,實驗組大鼠的體重增長緩慢或不增長,對照組體重正常增長,在第8、12周時二者有顯著差異(均為P<0.01)。實驗組大鼠血糖持續(xù)保持高水平,C肽持續(xù)保持低水平,各實驗組間比較無統(tǒng)計學(xué)差異,而對照組始終正常,實驗組和對照組之間比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。 2.光鏡下,與對照組大鼠心肌細胞相比,實驗組心肌細胞肥大、疏松樣變、肌絲斷裂,心肌細胞外間質(zhì)增加、纖維化。電鏡
4、下,對照組糖尿病大鼠心肌細胞中,肌絲排列整齊,明暗各帶清晰,線粒體結(jié)構(gòu)清晰、排列規(guī)整。實驗組心肌細胞肌絲稀疏、排列紊亂、有斷裂,線粒體腫脹、變形,嵴排列紊亂,部分線粒體破裂。隨著病程進展,病變漸加重。 3.血清ADPN水平實驗組于4周后均高于對照組(4周P<0.05,8、12周P<0.01),并隨著病變發(fā)展而升高(P<0.01)。 4.與對照組相比,T-cad在實驗組心肌組織中的表達較強,實驗組可見較清楚的棕紅色心肌細胞
5、膜,核周亦有表達,并隨著病變進展顏色加深,其平均光密度值逐漸增高,4周后各組均高于對照組(P<0-01)。 5.相關(guān)性分析顯示實驗組血清ADPN和心肌組織T-cad平均光密度值呈直線正相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r=0.794(P<0.01)。 結(jié)論: 1.成功的建立了STZ糖尿病大鼠模型,其心肌的病理學(xué)改變符合糖尿病性心肌病的改變。 2.血清ADPN水平不同時期實驗組均高于對照組,并隨著心肌病變進展而逐漸升高,與
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