清熱解毒方與涼血活血方防治術(shù)后腹腔粘連的實(shí)驗研究.pdf

1、一、術(shù)后腹腔粘連動物模型的建立與篩選
　　 目的:比較研究8種大鼠術(shù)后腹腔粘連模型的特點(diǎn)及應(yīng)用。
　　 方法:180只Wistar大鼠隨機(jī)分為9組，每組20只，設(shè)假手術(shù)組和8個模型組，各組按不同手術(shù)方式制作模型。術(shù)后詳細(xì)記錄動物生存情況，存活大鼠于術(shù)后第7天處死剖驗，按Nair五級評分標(biāo)準(zhǔn)對腹腔粘連進(jìn)行評價，并取粘連組織送檢病理。
　　 結(jié)果:E組(盲腸+切口兩側(cè)腹壁刷擦，100％)、D組（盲腸+切口右側(cè)腹壁刷擦

2、，90％）、Ⅰ組（止血鉗鉗夾十二指腸，75％）術(shù)后7天動物生存率明顯高于其他各組。G組（盲腸結(jié)扎+盲端開口+滑石粉涂抹，3.000±0.926）、H組（盲腸結(jié)扎穿孔+盲腸刷擦，3.500±0.577）和Ⅰ組（止血鉗鉗夾十二指腸，3.270±0.704）粘連程度優(yōu)于其他各組。
　　 結(jié)論:止血鉗鉗夾十二指腸致腹腔粘連模型是較理想的大鼠術(shù)后腹腔粘連模型。
　　 二、十二指腸鉗夾致術(shù)后腹腔粘連大鼠模型的形態(tài)學(xué)研究
　　

3、 目的:觀察術(shù)后14天內(nèi)十二指腸鉗夾致大鼠術(shù)后腹腔粘連形成過程中的組織學(xué)和形態(tài)學(xué)變化。
　　 方法:48只Wistar大鼠隨機(jī)分為6組，分別在術(shù)后即刻、術(shù)后第1、3、5、7和14天處死，取手術(shù)或者粘連部位，應(yīng)用光鏡及掃描電鏡進(jìn)行組織學(xué)和形態(tài)學(xué)觀察。
　　 結(jié)果:術(shù)后第1天時手術(shù)部位炎癥最為嚴(yán)重，粘連形成的范圍和強(qiáng)度分別在術(shù)后第3天和第5天時達(dá)到峰值，術(shù)后第7天時間皮細(xì)胞完全覆蓋手術(shù)部位;肌成纖維細(xì)胞從術(shù)后第3天開始大量增

4、殖。
　　 結(jié)論:十二指腸鉗夾可以誘發(fā)明顯的術(shù)后腹腔粘連，肌成纖維細(xì)胞在粘連形成過程中可能起重要作用。
　　 三、清熱解毒方與涼血活血方防治大鼠術(shù)后腹腔粘連的實(shí)驗研究
　　 目的:觀察清熱解毒方與涼血活血方對大鼠術(shù)后腹腔粘連的防治效果并探索其機(jī)制。
　　 方法:160只Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、抗生素治療組、瑞術(shù)康治療組、清熱解毒方組、涼血活血方組、兩方合用組、兩方序貫組等8組，制作十二指

5、腸鉗夾致大鼠術(shù)后腹腔粘連模型，并分別給藥治療7天。術(shù)后14天時處死剖驗并對粘連情況評分，取手術(shù)部位及粘連組織分別進(jìn)行HE染色和苦味酸-天狼星紅染色，鏡下觀察并攝片，對粘連組織纖維化、炎癥、血管增殖及Ⅰ、Ⅲ型膠原膠原含量進(jìn)行評價。
　　 結(jié)果:4個中藥治療組生存情況與模型組無差異。清熱解毒方組在術(shù)后腹腔粘連范圍、強(qiáng)度評分低于其他治療組。各組粘連主要涉及肝臟、十二指腸、大網(wǎng)膜及腹壁。清熱解毒方組、涼血活血方組纖維化評分低于其他組，4

6、個中藥治療組炎癥評分相似，血管增殖評分以清熱解毒方組為最低。清熱解毒方組粘連組織中Ⅰ、Ⅲ型膠原含量低于其他組。
　　 結(jié)論:清熱解毒方、涼血活血方、兩方合用及兩方序貫給藥均有一定的抗粘連效果，其中以清熱解毒方單用效果最佳;其抗粘連機(jī)理可能與其抗炎作用有關(guān)。
　　 四、基于抗體芯片技術(shù)的術(shù)后腹腔感染大鼠細(xì)胞因子譜分析
　　 目的:應(yīng)用抗體芯片技術(shù)篩選術(shù)后腹腔感染大鼠特異性標(biāo)志物。
　　 方法:20只Wist

7、ar大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗組和假手術(shù)組并分別手術(shù)，術(shù)后3天內(nèi)取大鼠腹腔灌洗液、血清、血漿及淋巴液送檢，應(yīng)用抗體芯片進(jìn)行檢測并篩選出差異表達(dá)蛋白。
　　 結(jié)果:從大鼠腹腔灌沈液、血清、血漿中分別篩選出19種、20種、22種差異表達(dá)蛋白。淋巴液檢測未能得出結(jié)果。其中IntegrinαMβ2、TRAIL兩種細(xì)胞因子在3組標(biāo)本中含量均有差異;CINC-2α/β、FADD、MuSK、IL-3、IL-4、TIE-2、TLR4等7種細(xì)胞因子在3組標(biāo)