鴨疫里默氏菌2型制苗菌株的篩選及其高密度發(fā)酵條件優(yōu)化的研究.pdf

1、鴨傳染性漿膜炎是由鴨疫里默氏菌引起的危害雛鴨的一種急性或慢性敗血性傳染病。其中以鴨里默氏菌2型對我國養(yǎng)鴨場的所造成的危害最大。本研究通過對從山東、廣西、四川等地分離的20株2型鴨疫里默氏菌分離株生理生化、藥敏試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：這20株2型菌株分離株其生理生化特性一致；分離株表現(xiàn)不同程度的耐藥性，而對頭孢噻肟鈉、氟苯尼考、綠都腸樂、羅紅霉素、阿奇霉素和阿莫西林敏感度較高。 將20株分離菌株培養(yǎng)物分別接種15日齡健康雛鴨，每只頸部皮下注射1

2、.0×10<'6>CFU/ml，觀察10天。人工發(fā)病試驗(yàn)結(jié)果表明：20株分離菌株對15日齡雛鴨致病性差異較大，致死率從0/10到10/10不等，其中sd-5株致病性最強(qiáng)，致死率為10/10；其次分別為sd-4(致死率S/10)hy-2(致死率7/10)，由此可選擇致病性較強(qiáng)的sd-5、sd-4、hy-2菌株作為制苗菌株的候選菌株． 通過對20株分離菌株制備的蜂膠疫苗免疫攻毒試驗(yàn)和ELISA抗體檢測發(fā)現(xiàn)，以sd-5株制備的蜂膠疫苗

3、，攻毒試驗(yàn)結(jié)果獲得5/5保護(hù)，所產(chǎn)生ELISA抗體水平最高，由此篩選出sd-5株為制苗菌株。 以sd-5株為研究對象進(jìn)行了高密度發(fā)酵試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)酵培養(yǎng)基的PH值是影響細(xì)菌生長的最為關(guān)鍵的因素，當(dāng)PH值為7.8以上時(shí)，發(fā)酵菌數(shù)急劇降低，細(xì)菌增殖能力下降，當(dāng)PH值為7.4時(shí)發(fā)酵能夠達(dá)到較為理想的菌數(shù)(OD<,525nm>值)。通過應(yīng)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)(L3<'4>)對發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化，試驗(yàn)結(jié)果表明：溫度為37.5℃，通氣量為1