RAAS系統(tǒng)拮抗劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠足細(xì)胞Nephrin表達(dá)和腎臟保護(hù)作用的影響.pdf

1、研究背景和目的：
　　 隨著我國(guó)人口的老齡化和人們生活方式的改變,原發(fā)性高血壓的患病率逐年升高。長(zhǎng)期高血壓可導(dǎo)致高血壓性腎損害,如不積極干預(yù),最終可導(dǎo)致慢性腎衰竭。良好的血壓控制無(wú)疑是遏制高血壓腎損害的基礎(chǔ),然而近年柬盡管隨著高血壓藥物的廣泛應(yīng)用,高血壓所導(dǎo)致的終術(shù)期腎病發(fā)生率卻呈上升趨勢(shì)。美國(guó)流行病學(xué)資料顯示,自1981-2001年因高血壓腎臟損害進(jìn)入慢性腎衰竭的患者人數(shù)增長(zhǎng)了近8倍,僅次于糖尿病腎病,估計(jì)到2030年將有兩百

2、多萬(wàn)慢性腎衰竭患者需要透析治療,不僅費(fèi)用巨大,且5年生存率只有50％高血壓導(dǎo)致的慢性腎臟疾病(chronickidneydisease,CKD)已成為透析患者的重要病因,高血壓是影響慢性腎臟疾病患者預(yù)后的一個(gè)主要危險(xiǎn)因素。因此,早期發(fā)現(xiàn)、診斷和控制血壓,預(yù)防高血壓性腎損害,延緩慢性腎衰竭的發(fā)生和發(fā)展,成為一項(xiàng)重要的臨床課題。腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(renin-angiotensin-aldosteronesysystem,RAAs

3、)在其中發(fā)揮著重要的作用,RAAS通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞外液容量、保持鈉平衡和調(diào)節(jié)心血管功能等作用參與維持血液動(dòng)力學(xué)的穩(wěn)定。早期的研究認(rèn)為,血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)是RAAS中參與高血壓和靶器官損害的主要物質(zhì),醛固酮(aidosterone,ALD)是高血壓引起腎損害的因素之一,與其受體結(jié)合后,通過(guò)血流動(dòng)力學(xué)和直接的細(xì)胞學(xué)效應(yīng)發(fā)揮致纖維化的作用。
　　 目前認(rèn)為足細(xì)胞裂孔隔膜的分子結(jié)構(gòu)和功能是維持腎小球?yàn)V過(guò)屏障的

4、主要因素,nephrin蛋白為其中重要蛋白之一,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)nephrin缺乏可造成腎小球硬化。本研究比較不同RAAS系統(tǒng)阻斷劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血壓和nephrin蛋白表達(dá)的影響以及腎臟保護(hù)作用。
　　 方法：
　　 實(shí)驗(yàn)分組:5只12周齡雄性Wistar-Kyoto(WKY)大鼠為對(duì)照組(A組),30只12周齡自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)隨機(jī)分為未用藥自發(fā)性高血壓組(B組)和雷米普利治療組(C組)、替米沙坦治療組(D組)、

5、伊普利酮治療組(E組)、雷米普利伊普利酮聯(lián)合治療組(F組)、替米沙坦伊普利酮聯(lián)合治療組(G組)。各5只。
　　 藥物灌胃:A組B組用等量飲用水灌胃,C組用雷米普利組[2.5 mg/(kg·d)]灌胃,D組用替米沙坦[10mg/(kg·d)]灌胃,E組用伊普利酮[100mg/(kg·d)]灌胃,F組伊普利酮[50mg/(kg·d)]+雷米普利組[1.125mg/(kg-d)]灌胃,G組用伊普利酮[50mg/(kg·d)]+替米沙坦

6、[5mg/(kg·d)]灌胃。共計(jì)8周。
　　 測(cè)血壓:實(shí)驗(yàn)第0、4、8周采用套尾法測(cè)量大鼠收縮血壓。
　　 標(biāo)本制備及病理改變:在第8周末處死大鼠,制備腎臟標(biāo)本,應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)腎臟組織nephrin蛋白水平。行HE染色,檢測(cè)腎臟病理切片并進(jìn)行評(píng)分,觀察腎臟損害程度。電鏡下腎臟足細(xì)胞病理改變。所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。各組間統(tǒng)計(jì)學(xué)比較通過(guò)方差分析(ANOVA)以及多重比較的Bonferroni事后檢驗(yàn)進(jìn)行。

7、r>　　 結(jié)果：
　　 1.各組收縮壓(SBP)水平比較B組血壓較A組逐漸升高(P＜0.05)。C、D、E、F和G組血壓較B組下降(P＜0.05),以F、G組下降最明顯(P＜0.01)2.腎臟的損害程度的比較光鏡下,A組腎小球、腎小管無(wú)病理改變,B組損害程度最大,C、D、E、F,G組腎小球病變較B組減輕,以F、G組減輕最明顯。
　　 3.足細(xì)胞的損傷、nephrin水平的比較電鏡下,B組足突細(xì)胞改變最大,nephrin

8、表達(dá)較A組顯著降低,余各組病理?yè)p傷較B組減輕,nephrin表達(dá)顯著高于B組(P＜0.05)。
　　 免疫組化觀察足細(xì)胞上nephrin表達(dá),B組較A組顯著降低,用藥組可以增加nephrin蛋白表達(dá)水平,以F、G增加最明顯(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.RASS拮抗劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠均有降壓作用,以依普利酮聯(lián)合雷米普或聯(lián)合替米沙坦組降壓作用最明顯。
　　 2.RASS拮抗劑對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠