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1、目的: 大鼠活體內(nèi)研究視神經(jīng)損傷后晶狀體蛋白對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinalganglioncellsRGCS)保護(hù)作用和軸突再生作用。 方法: 1、在正常Long-evens大鼠玻璃體腔注射不同濃度(1×10-3g/L,1×10-4g/L,1×10-5g/L)晶狀體蛋白5μl,5天后分別用光鏡和電鏡觀察視網(wǎng)膜及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。 2、在大鼠視神經(jīng)切斷傷模型中用熒光金逆行示蹤技術(shù)觀察損傷后1周、2周、3周節(jié)細(xì)
2、胞存活率及小膠質(zhì)細(xì)胞活化的情況。 3、損傷后1周、2周、4周、8周,在大鼠視神經(jīng)鉗夾傷模型中使用麥芽凝集素(WGA)順行示蹤技術(shù)及損傷后4周、8周、12周電鏡觀察軸突再生的情況。 4、傷后1周、2周、4周、8周行F-VEP檢查,觀察大鼠視功能恢復(fù)情況。 結(jié)果: 1、大鼠玻璃體腔注射1×10-3g/L、1×10-4g/L、1×10-5g/L晶狀體蛋白,光鏡觀察各組視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)正常,注射1×10-3g/L組
3、電鏡觀察RGCs線(xiàn)粒體稍腫脹,線(xiàn)粒體嵴輕微損傷,注射其余兩濃度組RGCs無(wú)異常。 2、玻璃體腔注射生理鹽水在視神經(jīng)切斷傷后1周、2周、3周RGCs數(shù)分別下降為正常組的51.5%、17.9%、12.2%,而混合晶狀體蛋白組為70.6%、32.2%和15.2%,均顯著高于生理鹽水對(duì)照組(P<0.01),兩周時(shí)高于牛血清白蛋白對(duì)照組(P<0.01)。 3、玻璃體腔注射晶狀體蛋白眼較生理鹽水對(duì)照眼晚出現(xiàn)膠質(zhì)反應(yīng),傷后1周、2周、
4、3周小膠質(zhì)細(xì)胞計(jì)數(shù)均少于對(duì)照眼。 4、視神經(jīng)損傷后玻璃體腔注射晶狀體蛋白組有更多軸突纖維盡快通過(guò)損傷區(qū),通過(guò)損傷區(qū)的再生軸突的數(shù)目增多,促進(jìn)F-VEP振幅恢復(fù)。 結(jié)論: 1、玻璃體腔注射1×10-4g/L、1×10-5g/L晶狀體蛋白5μl對(duì)視網(wǎng)膜及RGCs無(wú)毒副作用。 2、玻璃體腔注射晶狀體蛋白在視神經(jīng)損傷后1-3周可提高RGCs存活率,減輕傷后視網(wǎng)膜中膠質(zhì)反應(yīng),使活化的小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)目減少,并延遲活化過(guò)
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