2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、本文研究漢族人VDR基因單核苷酸多態(tài)性與LDDD的關(guān)系,以探索漢族人LDDD的相關(guān)遺傳基礎(chǔ)。 測定VDR基因多態(tài)性的方法常用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)法,按PCR-RFLP法測定部分標(biāo)本后發(fā)現(xiàn)其精確性較差。于是將半定量PCR方法應(yīng)用到PCR-RFLP測定法中,用于測定VDR基因型,結(jié)果顯示其精確性和可重復(fù)性得到明顯提高。 采用半定量PCR-RFLP法測定VDR受體基因多個位點的多態(tài)性。結(jié)合這些

2、標(biāo)本所對應(yīng)的LDDD臨床癥狀和MRI,分析VDR基因多態(tài)性與LDDD的關(guān)系。發(fā)現(xiàn)在VDR基因的FokI、BsmI、ApaI、TruI和TaqI5個限制性內(nèi)切酶位點多態(tài)性中,TapI酶切位點多態(tài)性與LDDD相關(guān)。 第一部分:半定量PCR-RFLP酶切法的建立及VDR基因多態(tài)性測定方法探討目的:探討將半定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)方法,應(yīng)用于PCR-RFLP酶切法中對提高基因多態(tài)性測定精確性和可重復(fù)性的作用;用此方法檢測維生素D受體(

3、VDR)基因多態(tài)性。 研究方法:收集81例健康漢族人外周靜脈血標(biāo)本,從血標(biāo)本中提取基因組DNA,依照常規(guī)方法取不同酶量用限制性片段多態(tài)性(RFLP)酶切法先后測定81例漢族人維生素D受體(VDR)基因BsmI酶切位點多態(tài)性;對PCR產(chǎn)物進(jìn)行半定量和分類后,調(diào)整酶切體系中產(chǎn)物濃度,先后用不同酶量測定此組漢族人VDRBsmI、TruI多態(tài)性,考察其一致性。 研究結(jié)果:1.PCR-RFLP和半定量PCR-RFLP法測定81例漢

4、族人VDR基因BsmI酶切位點多態(tài)性,先后兩次測定的Kappa值為0.71和0.87,差別有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.01。2.測得漢族人的VDRBsmI位點基因型頻率為BB6.2%,Bb49.4,bb44.4%;VDRTruI基因型頻率為T'T'69.1%,T't'25.9%,t't'4.9%。 研究結(jié)論: 1.應(yīng)用半定量PCR方法可明顯提高PCR-RFLP酶切法的精確性和可重復(fù)性。 2.漢族人VDR基因存在TruI

5、多態(tài)性,其多態(tài)性分布與白種人群不同。 第二部分:漢族人VDR基因多態(tài)性與退變性腰椎間盤病的關(guān)系目的:應(yīng)用半定量聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)法測定漢族人維生素D受體(VDR)基因多態(tài)性;結(jié)合退變性腰椎間盤病(LDDD)的臨床和MRI表現(xiàn)探討VDR基因多態(tài)性與LDDD的關(guān)系。 研究方法:收集漢族人群中81例有LDDD癥狀的患者和101例對照者的外周靜脈血標(biāo)本以及MRI。病例組中男41例,女40例,年

6、齡(42.7±13.7)歲,對照組中男40例,女61例,年齡為(38.4±12.6)歲。提取標(biāo)本的基因組DNA,用半定量PCR-RFLP法測定對照組和病例組標(biāo)本的VDRFokI、ApaI、TaqI、BsmI和TruI酶切位點多態(tài)性;根據(jù)MRI顯示的信號差異按Schneiderman分級法確定各個體腰椎間盤的退變程度,分為無LDDD、輕度LDDD、中度LDDD與重度LDDD四組。分析病例-對照組中基因型、等位基因頻率分布規(guī)律;分析基因型分

7、布、等位基因頻率與腰椎間盤退變MRI分級的關(guān)系; 研究結(jié)果: 1.對照組中FokI、BsmI、ApaI、TruI(用T'、t'表示)和TaqI位點的等位基因頻率的分布為F59.4%,f40.6%;B31.1%,b68.8%;A34.7%,a65.3%;T'79.2%,t'20.8%;T92.1%,t7.9%。病例組中VDRFokI、VDRBsmI、VDRApaI、VDRTruI和TaqI酶切位點的等位基因頻率的分布為:F

8、53.7%,f46.3%;B37.0%,b63.0%;A28.4%,a71.6%;T'80.9%,t'19.1%;T98.8%,t1.2%。病例組中VDRTaqI等位基因T攜帶者明顯多于對照組。差別有統(tǒng)計學(xué)意義。 2.在MRI分組中,VDRTaqI基因TT型在重度LDDD的分布比中度LDDD、輕度LDDD和無LDDD高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而VDRFokI、BsmI、ApaI、TruI位點的基因型分布差異無統(tǒng)計學(xué)意

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