小鼠癲癇模型建立的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、癲癇是神經(jīng)科的常見疾病。統(tǒng)計(jì)資料顯示，我國(guó)癲癇患病率為7.0‰，據(jù)此估算我國(guó)現(xiàn)有癲癇患者約900萬人。癲癇不僅給患者造成身體上的危害，還嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，導(dǎo)致一系列精神心理問題，給家庭和社會(huì)帶來沉重負(fù)擔(dān)。癲癇發(fā)作、認(rèn)知功能、精神行為狀態(tài)、社會(huì)功能、自信心及羞恥感等因素都可能影響患者的生活質(zhì)量。學(xué)者們逐漸認(rèn)識(shí)到，控制發(fā)作僅是癲癇患者綜合管理的一部分，社會(huì)、生理、心理等因素可能對(duì)癲癇患者生活質(zhì)量造成不同程度的影響。癲癇治療的目標(biāo)已從單純

2、控制和減少發(fā)作，轉(zhuǎn)變?yōu)樽畲蟪潭鹊靥岣呋颊叩纳钯|(zhì)量。
　　顳葉癲癇是成人中最常見的癲癇綜合征，占部分性癲癇的1/3以上，難治性癲癇的半數(shù)以上。研究證實(shí)顳葉癲癇是受遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的復(fù)雜多因性疾病，易感基因在決定顳葉癲癇病因和臨床表現(xiàn)型上發(fā)揮作用。顳葉癲癇分為內(nèi)側(cè)型和外側(cè)型兩種臨床亞型。顳葉內(nèi)側(cè)癲癇是最常見的藥物難治性癲癇之一，早期外科手術(shù)治療對(duì)控制發(fā)作、提高認(rèn)知功能和改善預(yù)后均有重要意義。
　　海人酸(kanica

3、cid,KA)是腦內(nèi)興奮性氨基酸遞質(zhì)—谷氨酸的結(jié)構(gòu)類似物。KA模型具有模擬人類顳葉癲癇的理想條件:1.海馬杏仁核在癲癇表現(xiàn)中起核心作用;2.有人類顳葉癲癇相似的病理改變，如神經(jīng)元缺失、膠質(zhì)增生和苔蘚纖維發(fā)芽;3.有如人類癥狀性顳葉癲癇的臨床表現(xiàn):初始的腦部損害后，經(jīng)過一段無癥狀的靜止期，最終出現(xiàn)反復(fù)自發(fā)性癲癇發(fā)作;4.抗癲癇藥物對(duì)KA引起的癲癇作用差。因此海人酸癲癇模型能很好地模擬人類顳葉癲癇，是研究癲癇發(fā)展變化、致病機(jī)理的有效工具。海

4、人酸模型已廣泛用于癲癇發(fā)作的研究，許多學(xué)者將海人酸腹腔注射或立體定向海馬內(nèi)注射應(yīng)用，成功地誘導(dǎo)出類似于人類皮質(zhì)癲癇的動(dòng)物模型，為癲癇的發(fā)病機(jī)制和治療方法的研究提供了重要的手段。本實(shí)驗(yàn)旨在建立海人酸顳葉癲癇動(dòng)物模型，觀察其發(fā)展過程中癥狀、腦電圖、病理改變及藥物治療的作用，探討該模型的病理機(jī)制和致癇機(jī)理。
　　第一部分構(gòu)建海人酸急性致癇小鼠模型的研究
　　目的：建立海人酸誘導(dǎo)的小鼠急性癲癇模型，并探討其特點(diǎn)。方法：實(shí)驗(yàn)取健康雄性

5、昆明小鼠99只，隨機(jī)分為生理鹽水組（n=33）和致癇組（n=66），致癇組腹腔注射海人酸10mg/kg，生理鹽水組腹腔注射生理鹽水35μl/g。注射后連續(xù)5h觀察小鼠是否有癇性發(fā)作并分級(jí)。當(dāng)小鼠持續(xù)癇性發(fā)作達(dá)1h時(shí)給予地西泮4mg/kg腹腔注射，對(duì)照組3只和致癇組9只同時(shí)描記腦電圖，并取腦切片后蘇木精-伊紅染色法觀察海馬各區(qū)病理學(xué)改變。結(jié)果：①行為學(xué)表現(xiàn)，模型組小鼠注射海人酸后可出現(xiàn)濕狗樣抖動(dòng)、頭面部肌肉陣攣、肢體陣攣及全面強(qiáng)直陣攣發(fā)作

6、。生理鹽水對(duì)照組未見癲癇發(fā)作。②腦電圖表現(xiàn)，癲癇持續(xù)狀態(tài)小鼠表現(xiàn)為持續(xù)性節(jié)律性棘波、棘慢波或高波幅慢波。③病理學(xué)研究，雙側(cè)海馬均可出現(xiàn)神經(jīng)元變性，以CA1和門區(qū)為主。結(jié)論：腹腔注射海人酸致癇小鼠急性模型同相應(yīng)的大鼠模型一樣，具有制作簡(jiǎn)便、癇性發(fā)作潛伏期短、致癇率高等特點(diǎn)，其所產(chǎn)生的急性癲癇模型具有與人類顳葉癲癇相似的行為、腦電圖與神經(jīng)病理改變。
　　第二部分青霉素與海人酸癲癇模型的比較的研究
　　目的：通過用青霉素、海人酸2

7、種藥物制作癲癇模型，探討2種致癇劑的作用特點(diǎn)及應(yīng)用條件。方法：實(shí)驗(yàn)取健康雄性昆明小鼠90只，隨機(jī)分為3組，對(duì)照組(n=10)、青霉素致癇組(n=40)和海人酸致癇組(n=40)，青霉素致癇組腹腔注射青霉素7×106U/kg，海人酸致癇組腹腔注射海人酸10mg/kg，生理鹽水組腹腔注射生理鹽水35μL/g。注射后連續(xù)5h觀察小鼠是否有癇性發(fā)作并分級(jí)，進(jìn)行腦電圖描記。結(jié)果：空白對(duì)照組無癇性發(fā)作，兩組模型均出現(xiàn)癇性發(fā)作，海人酸致癇組與青霉素致