伊立替康致小鼠遲發(fā)性腹瀉模型的建立和中藥干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景與目的:伊立替康是腫瘤臨床常用的化療藥，其不良反應(yīng)一遲發(fā)性腹瀉為劑量限制性毒性反應(yīng)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和對(duì)化療的耐受性。本研究目的1、建立伊立替康遲發(fā)性腹瀉模型；2、探討預(yù)先灌胃中藥加味半夏瀉心湯對(duì)伊立替康遲發(fā)性腹瀉模型是否有預(yù)防作用，并觀察血清IL-15、腸道pH值、β-葡萄糖醛酸苷酶、小腸組織PCNA表達(dá)情況等初步探討其可能機(jī)制。　　方法：健康雄性ICR小鼠48只，先隨機(jī)選取12只，分為模型組(n=6)和正常組(n=6)，

2、模型組腹腔注射伊立替康，75mg·kg-1×4天，建立伊立替康遲發(fā)性腹瀉模型。其余36只小鼠隨機(jī)分為6組，每組6只：正常對(duì)照組，腹瀉模型組，中藥高劑量組，中藥中劑量組，中藥低劑量組，陽(yáng)性對(duì)照組。正常對(duì)照組和腹瀉模型組灌胃蒸餾水0.7ml/100g×7天，中藥高、中、低劑量組分別按1.4ml/100g，0.7ml/100g，0.35ml/100g不同劑量每日灌胃中藥×7d，陽(yáng)性對(duì)照組為洛哌丁胺1.2ml/100g，每日灌胃給藥×7d。從第

3、2天起正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水75mg·kg-1×4天，其余各組腹腔注射伊立替康75mg·kg-1×4天。記錄各組小鼠的體重和末次注射伊立替康后的腹瀉指數(shù)；第8天心臟取血測(cè)定血清IL-15含量；取小鼠空腸、回腸、盲腸內(nèi)容物測(cè)定pH值：取盲腸、結(jié)腸內(nèi)容物測(cè)定腸道β-葡萄糖醛酸苷酶；在腸道炎癥明顯處分別取空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸，H-E染色，觀察腸道病理組織學(xué)變化；同時(shí)行免疫組織化學(xué)染色，比較中藥高、中、低劑量組和腹瀉模型組小腸組織PCNA

4、表達(dá)情況。 結(jié)果：1、遲發(fā)性腹瀉模型建立：模型組于連續(xù)用藥后第5天腹瀉率達(dá)100％，平均腹瀉指數(shù)為1.354±0.055，而正常組小鼠腹瀉率和腹瀉指數(shù)均為0。兩組小鼠平均腹瀉指數(shù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；2、中藥干預(yù)的研究：①體重比較：中藥高、中、低劑量組小鼠體重變化較腹瀉模型組有明顯改善(P<0.01)，但陽(yáng)性對(duì)照組改變不明顯(P>0.05)；②腹瀉指數(shù)：末次伊立替康注射24小時(shí)后中藥高、中、低劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組小鼠腹

5、瀉指數(shù)較腹瀉模型組降低(P<0.01)③免疫指標(biāo)：與腹瀉模型組比較，中藥高、中劑量組血清IL-15含量升高(P<0.01)，中藥低劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)明顯改變(P>0.05)；④腸道pH值：各組小鼠空腸和回腸pH值無(wú)明顯差異(P>0.05)；與腹瀉模型組比較，中藥高、中、低劑量組盲腸內(nèi)容物pH值升高(P<0.01)，陽(yáng)性對(duì)照組無(wú)明顯改變(P>0.05)；⑤腸道β-葡萄糖醛酸苷酶：在盲腸，與腹瀉模型組比較，中藥高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組酶活性明

6、顯降低，而中藥中劑量組酶活性卻升高(P<0.01)，中藥低劑量組無(wú)明顯改變；在結(jié)腸，中藥高、中、低劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組酶活性較腹瀉模型組降低(P<0.01)，而且中藥高、中劑量組降低酶活性的作用強(qiáng)于中藥低劑量組(P<0.01)；⑥腸粘膜病理及PCNA的表達(dá)：中藥高、中、低劑量組明顯改善腸粘膜損傷情況，維護(hù)腸粘膜完整性，陽(yáng)性對(duì)照組對(duì)腸粘膜無(wú)保護(hù)作用；與正常對(duì)照組相比，腹瀉模型組小腸組織PCNA指數(shù)明顯降低(P<0.01)，中藥高、中、低劑量

7、組小腸組織PCNA指數(shù)較腹瀉模型組顯著升高(P<0.01)。 結(jié)論：1、應(yīng)用ICR小鼠，腹腔給藥，用腹瀉指數(shù)評(píng)定，可以建立一種成本較低，觀察指標(biāo)較全面、客觀的伊立替康遲發(fā)性腹瀉模型。2、預(yù)先應(yīng)用中藥加味半夏瀉心湯①能預(yù)防伊立替康遲發(fā)性腹瀉的發(fā)生，且療效與中藥劑量有關(guān)；②促進(jìn)血清IL-15的生成，且促進(jìn)作用可能與中藥劑量成一定的量效關(guān)系；③升高盲腸內(nèi)pH值，降低結(jié)腸內(nèi)β-葡萄糖醛酸苷酶活性；④保護(hù)腸粘膜結(jié)構(gòu)完整性，促進(jìn)腸隱窩上皮細(xì)