小鼠實(shí)驗(yàn)性視神經(jīng)炎模型的建立.pdf

1、目的：用髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白多肽(MOG35-55)誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)小鼠模型，觀察EAE的視覺(jué)電生理、OCT、組織病理學(xué)變化以及細(xì)胞凋亡的檢測(cè)。
　　方法：用MOG35-55抗原加完全弗氏佐劑免疫C57BL/6小鼠,在免疫后的第0天，第7天，第14天，第20天，第30天，第40天應(yīng)用閃光視覺(jué)誘發(fā)電位（f-VEP）、閃光視網(wǎng)膜電圖（f-ERG）和光學(xué)相干斷層（OCT），觀察小鼠視覺(jué)功能的變化。同時(shí)在第14天，

2、第20天，第30天，第40天用光鏡、電鏡觀察 EAE組與CON組小鼠組織病理學(xué)改變。分別應(yīng)用 HE染色、Luxol Fast Blue染色以及TUNEL檢測(cè)分別評(píng)估炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)、髓鞘的脫失、軸索病理改變和細(xì)胞的凋亡。
　　結(jié)果：⑴OCT：EAE各組RNFL厚度變?。≒﹤0.05 vs CON組）。⑵f-VEP：EAE組潛伏期延長(zhǎng)，振幅下降（P﹤0.05 vsCON組）；40天時(shí)出現(xiàn)恢復(fù)。⑶f-ERG：EAE組b波潛伏期延長(zhǎng)（除4

3、0天組外），b波振伏下降（P﹤0.05 vsCON組）。⑷HE染色：EAE組視神經(jīng)中見(jiàn)中等量或大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（以第20天、30天最多），視網(wǎng)膜中見(jiàn)神經(jīng)纖維層不同程度水腫。⑸LFB染色：EAE組隨著病程的延長(zhǎng)，髓鞘出現(xiàn)脫失，以30天最明顯，40天時(shí)，脫失的髓鞘出現(xiàn)薄層再生。⑹透射電鏡：EAE組隨時(shí)間延長(zhǎng)，髓鞘出現(xiàn)水腫、脫失，40天見(jiàn)髓鞘薄層重建。⑺TUNEL檢測(cè)：EAE組陽(yáng)性凋亡細(xì)胞數(shù)目隨著病程的延長(zhǎng)逐漸增加（P﹤0.05 vs CON