多巴胺D2受體在腺苷A-,2A-受體基因敲除小鼠近視恢復(fù)中的作用.pdf

1、目的:腺苷A2A受體基因敲除小鼠與野生形小鼠相比有明顯的相對近視,且其相對近視在五周齡后會逐漸恢復(fù)并最終消失,本研究的目的是研究多巴胺D2受體在腺苷A2A受體基因敲除小鼠近視恢復(fù)中的作用。
　　 方法:首先運(yùn)用免疫熒光的方法檢測小鼠視網(wǎng)膜上多巴胺D2受體的表達(dá)情況；其次運(yùn)用HPLC-MS的方法檢測五周齡大的野生型小鼠腹腔注射D2受體拮抗劑Sulpiride后,藥物能否到達(dá)小鼠的視網(wǎng)膜；其后采用SPF級飼養(yǎng)的五周齡大的A2A受體基

2、因敲除小鼠及普通飼養(yǎng)的野生型小鼠作為實(shí)驗(yàn)動物,每種鼠隨機(jī)分成兩組,分別腹腔注射D2受體拮抗劑Sulpiride及Sulpiride的溶劑DMSO；給藥兩周后,測量小鼠的眼球參數(shù),包括:角膜曲率、瞳孔直徑、EIR(屈光力)及OCT(眼球各層厚度),用以檢測藥物是否引起小鼠眼球參數(shù)的改變；給藥三周后,測量小鼠視網(wǎng)膜的ERG(電生理),用以檢測藥物是否引起小鼠視網(wǎng)膜功能的改變；給藥四周后,再次測量小鼠的眼球參數(shù),測完后取材,即取整個(gè)眼球固定做

3、冰動切片,用以做免疫熒光檢測藥物是否引起視網(wǎng)膜上D2受體表達(dá)量的改變。
　　 結(jié)果:1、免疫熒光結(jié)果顯示W(wǎng)T小鼠視網(wǎng)膜上有多巴胺D2受體的表達(dá)；
　　 2、HPLC-MS結(jié)果顯示Sulpiride能夠到達(dá)小鼠的視網(wǎng)膜；
　　 3、給藥兩周后結(jié)果顯示,A2A小鼠Sulpiride組與DMSO組相比有明顯的相對近視及眼軸延長；WT小鼠Sulpiride組與DMSO組相比其屈光力無明顯差異,但其玻璃體腔有明顯延長。

4、r>　　 4、給藥三周后結(jié)果顯示,A2A小鼠Sulpiride組與DMSO組相比有明顯的視網(wǎng)膜功能的改變；WT小鼠Sulpiride組與DMSO組相比也有明顯的視網(wǎng)膜功能的改變。
　　 5、給藥四周后結(jié)果顯示,A2A小鼠及WT小鼠其Sulpiride組與DMSO組相比均無屈光力差異；但WT小鼠Sulpiride組與DMSO組相比有明顯的前房縮短和玻璃體腔延長。
　　 結(jié)論:D2受體拮抗劑Sulpiride能夠延緩七周齡