基因敲除腺苷A2A受體對慢性低O2高CO2模型小鼠海馬細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:研究基因敲除腺苷A2A受體對慢性低O2高CO2模型小鼠海馬細(xì)胞凋亡的影響及可能的機(jī)制。
　　方法:16只野生型和16只敲除型雄性小鼠分別隨機(jī)分為低O2高CO24周野生組(4HH+/+);對照野生組(NC+/+)和低O2高CO24周敲除組（4HH-/-）:對照敲除組(NC-/-)，每組8只。將4HH組小鼠置于常壓低O2高CO2艙內(nèi)，通過N2調(diào)節(jié)艙內(nèi)O2濃度使其降低并維持在9％-11％，通過CO2調(diào)節(jié)使其濃度維持在5.5％-6.

2、5％，每天8h，每周6d。其余時(shí)間與NC組在同一室內(nèi)飼養(yǎng)，持續(xù)4周。原位末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測海馬細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)，caspase-3活性檢測試劑盒測定海馬caspase-3活性，實(shí)時(shí)定量PCR檢測海馬Bcl-2mRNA，BaxmRNA表達(dá)量，蛋白免疫印跡(Western Blot)檢測海馬磷酸化p38蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)AI:
　　與所對應(yīng)的NC組相比4HH小鼠海馬的AI明顯升高(P＜0.05);與4H

3、H-/-組相比，4HH+/+組升高更明顯(P＜0.05);
　　(2) Caspase-3活性:
　　與所對應(yīng)的NC組相比4HH小鼠海馬的Caspase-3活性明顯升高(P＜0.05);與4HH-/-組相比，4HH+/+組升高更明顯(P＜0.05);
　　(3) Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表達(dá):
　　與所對應(yīng)的NC組相比4HH小鼠海馬Bcl-2 mRNA表達(dá)明顯下調(diào)（P＜0.01）而Bax mRNA表

4、達(dá)明顯上調(diào)（P＜0.01），與4HH-/-組相比4HH+/+組的Bcl-2 mRNA表達(dá)下調(diào)更明顯而Bax mRNA表達(dá)上調(diào)更明顯(P＜0.01);
　　(4) Western blot檢測結(jié)果顯示:與所對應(yīng)的NC組相比4HH小鼠海馬磷酸化p38蛋白表達(dá)量均明顯上調(diào)(P＜0.01)，與4HH-/-組相比4HH+/+組上調(diào)更明顯(P＜0.01);
　　(5)上述各指標(biāo)在兩對照組即（NC+/+）與(NC-/-)之間均沒有明顯差別

5、(P＞0.05)。
　　結(jié)論:(1)慢性低O2高CO2模型小鼠較對照組海馬細(xì)胞凋亡數(shù)增加;Bcl-2 mRNA表達(dá)明顯下調(diào)而Bax mRNA表達(dá)明顯上調(diào);磷酸化p38蛋白表達(dá)量明顯上調(diào);
　　(2)基因敲除腺苷A2A受體可能通過抑制p38MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的活化，抑制BaxmRNA基因表達(dá)和促進(jìn)Bcl-2mRNA基因表達(dá)而減少慢性低O2高CO2模型小鼠海馬細(xì)胞凋亡;
　　(3)基因敲除腺苷A2A受體對對照組小鼠海馬細(xì)