健康育齡婦女陰道內(nèi)乳酸桿菌菌群的分離與鑒定.pdf

1、乳酸桿菌(Lactobacillus spp.)是育齡婦女正常陰道微生態(tài)菌群的主要組成部分，通過產(chǎn)生乳酸、過氧化氫、細菌素及其它的抗微生物物質(zhì)來抑制陰道中的致病微生物，從而維護陰道的正常生理環(huán)境。臨床研究表明，產(chǎn)生過氧化氫的乳酸桿菌的存在可以降低細菌性陰道病、淋病和HIV的發(fā)病率。本研究對223例健康育齡婦女陰道內(nèi)的乳酸桿菌進行收集、分離、培養(yǎng)，并利用16SrRNA基因分析法鑒定細菌種屬，從而了解我國育齡婦女正常陰道內(nèi)乳酸桿菌的主要種類

2、，分析其產(chǎn)生過氧化氫的能力，并研究乳酸桿菌隨時間的定植變化，為利用乳酸桿菌進行微生態(tài)治療提供依據(jù)。
　　 第—部分：健康育齡婦女陰道內(nèi)乳酸桿菌菌群的分離與鑒定
　　 目的：調(diào)查健康育齡婦女陰道內(nèi)乳酸桿菌的主要菌群種類及其產(chǎn)生過氧化氫的能力。方法：采集223例健康育齡婦女陰道側(cè)壁的分泌物，經(jīng)過乳酸桿菌選擇性培養(yǎng)基(Rogosa)分離培養(yǎng)后，提取細菌染色體DNA，PCR擴增細菌的16S rRNA基因，測定16S rRNA核苷

3、酸序列，然后與基因庫(GenBank)中的數(shù)據(jù)進行比對，確定細菌的種類。并對乳酸桿菌產(chǎn)生過氧化氫的能力進行分析。結(jié)果：從223例健康育齡婦女陰道中分離到8種乳酸桿菌，較常見的種屬為卷曲乳桿菌L.crispatus(53.7％)，詹氏乳桿菌L.jensenii(27.9％)與格氏乳桿菌L.gasseri(10.3％)。其它少見的細菌類型包括陰道乳桿菌L.vaginalis(2.2％)，L.coleohominis(1.5％)，約氏乳桿菌L

4、.johnsonii(1.5％)，嗜酸乳桿菌L.acidophilus(1.5％)及發(fā)酵乳桿菌L.fermentum(1.5％)。大多數(shù)乳酸桿菌均能產(chǎn)生過氧化氫，L.crispatus、L.jensenii和L.acidophilus產(chǎn)生過氧化氫的能力較強。結(jié)論：L.crispatus、L.jensenii與L.gasseri是健康育齡婦女陰道內(nèi)乳酸桿菌的主要種屬。L.crispatus、L.jensenii和L.acidophilus

5、有較強的產(chǎn)生過氧化氫的能力。
　　 第二部分：陰道內(nèi)乳酸桿菌隨時間變化的初步研究
　　 目的：探討陰道內(nèi)乳酸桿菌是否隨時間發(fā)生變化，即乳酸桿菌的穩(wěn)定性，探討益生菌的適宜種類。方法：對16例分離到乳酸桿菌的婦女進行長約3個月的隨訪，于月經(jīng)間期采集陰道側(cè)壁的分泌物，分離、培養(yǎng)及鑒定方法同上。結(jié)果：10例受試者的優(yōu)勢菌種在隨訪期內(nèi)均與初始種類相同，6例受試者陰道內(nèi)的優(yōu)勢乳酸桿菌在隨訪期間丟失或轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌N類，乳酸桿菌是否發(fā)生變