敵敵畏納米乳劑與普通乳油的滅蟑效果及其抗性產(chǎn)生的對(duì)比研究.pdf

1、近年來(lái)化學(xué)殺蟲(chóng)劑廣泛、不合理地使用導(dǎo)致昆蟲(chóng)的抗藥性問(wèn)題越來(lái)越突出。同時(shí)傳統(tǒng)的殺蟲(chóng)劑型給人畜帶來(lái)了巨大危害，也給環(huán)境帶來(lái)了巨大的壓力。因此開(kāi)發(fā)新的綠色農(nóng)藥劑型已成為人們?nèi)找骊P(guān)注的問(wèn)題。 水基型納米乳劑具有對(duì)人畜低毒、易稀釋、不易燃、不易爆、對(duì)環(huán)境污染小的特點(diǎn)，因此成為國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥劑型開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)。 本課題通過(guò)自行研究制備得到敵敵畏(DDVP)納米乳劑，并將其作用于德國(guó)小蠊，觀察其對(duì)德國(guó)小蠊的毒力及其抗性相關(guān)酶活性的影響，探討D

2、DVP納米乳劑引起昆蟲(chóng)抗性產(chǎn)生的速度。同時(shí)與普通乳油進(jìn)行對(duì)比，以期為病媒昆蟲(chóng)的防治提供一種新的高毒力、低抗性的殺蟲(chóng)劑劑型。并通過(guò)對(duì)德國(guó)小蠊抗性相關(guān)酶活性的研究，為采用抗性生化檢測(cè)方法提供依據(jù)。 1.DDVP納米乳劑的研制及其表征。首先優(yōu)化篩選得到乳劑中表面活性劑、助乳化劑的比例。通過(guò)電磁加熱攪拌器攪拌使乳液中各成分充分混合，加快DDVP納米乳劑自發(fā)乳化的速度，最終研制得到DDVP納米乳劑。該乳劑呈淺黃色、透明、均勻、不分層，理化

3、性質(zhì)穩(wěn)定，-20±2℃和52±2℃下儲(chǔ)藏14天，室溫下放置2個(gè)月均未發(fā)生渾濁。乳油平均粒徑為11.2±1.9nm，稀釋10000倍后95％乳油粒徑范圍為76-103nm。該乳劑符合納米乳劑的特性，可以用于對(duì)德國(guó)小蠊的毒力研究。 2.DDVP納米乳劑與普通乳油的毒力對(duì)比。利用微量點(diǎn)滴法分別測(cè)定DDVP納米乳劑、普通乳油對(duì)德國(guó)小蠊的半數(shù)致死量(LDso)，得到LD<,50>分別為0.0465μg/蟲(chóng)和O.2517μg/蟲(chóng)，對(duì)兩種殺蟲(chóng)

4、劑的LD<,50>進(jìn)行t檢驗(yàn)，得到t=3.5447(p<0.05)，可以認(rèn)為DDVP納米乳劑的毒力高于DDVP納米乳油。 3. DDvP納米乳劑、普通乳油的施藥量和施藥周期對(duì)德國(guó)小蠊抗性相關(guān)酶活性的影響。 3.1 DDVP納米乳劑、普通乳油的施藥量對(duì)德國(guó)小蠊抗性相關(guān)酶活性的影響。結(jié)果顯示在低于DDVP乳油的濃度下，DDVP納米乳劑對(duì)德國(guó)小蠊的乙酰膽堿酯酶(AchE)、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)和1-NA酯酶的抑制作用比

5、DDVP乳油要強(qiáng)。對(duì)酸性磷酸酯酶(ApE)開(kāi)始產(chǎn)生抑制作用的濃度明顯低于乳油組：本次研究中DDVP納米乳劑抑制ApE的起始濃度為0.004％，而DDVP乳油均為0.01％。說(shuō)明DDVP納米乳劑可以提高德國(guó)小蠊靶標(biāo)部位的敏感性，這有可能會(huì)減緩德國(guó)小蠊對(duì)DDVP納米乳劑的抗藥性產(chǎn)生。 3.2 DDVP納米乳劑、普通乳油的施藥周期對(duì)德國(guó)小蠊抗性相關(guān)酶活性的影響。在DDVP納米乳劑作用下，隨著施藥時(shí)間的延長(zhǎng)，AchE酶活性呈現(xiàn)波動(dòng)性抑制

6、趨勢(shì)；GST、ApE和1-NA酯酶用藥初期都發(fā)生了誘導(dǎo)激活，而后被抑制，但ApE和1-NA的抑制作用至施藥后第18天尚未消失，而GST抑制后逐漸恢復(fù)到原水平。DDVP納米乳劑對(duì)這四種酶的最大抑制作用分別出現(xiàn)在施藥后第18、9、18、18天。DDVP乳油施藥后AchE和GST酶活性先抑制而后有所恢復(fù)，ApE短暫抑制后，同1-NA酯酶一樣出現(xiàn)酶活性升高。在0.0001％濃度時(shí)，DDVP乳油僅對(duì)AchE、GST和ApE三種酶產(chǎn)生了抑制，且最大

7、抑制作用分別出現(xiàn)在施藥后第3、5、1天。結(jié)果表明DDVP納米乳劑對(duì)德國(guó)小蠊各種抗性相關(guān)酶活性的最大抑制作用出現(xiàn)較晚。多次低劑量接觸DDVP乳油可使德國(guó)小蠊對(duì)其產(chǎn)生抗藥性。本次研究中在DDVP納米乳劑的作用下，AchE、ApE和1-NA酯酶雖未出現(xiàn)酶活性抑制后回升，但是由于GST的活性出現(xiàn)回升，提示德國(guó)小蠊對(duì)DDVP納米乳劑有可能也會(huì)產(chǎn)生抗藥性。 4. 德國(guó)小蠊對(duì)DDVP納米乳劑、普通乳油的抗藥性產(chǎn)生速度的對(duì)比研究。 DDVP納米

8、乳劑、普通乳油分別處理德國(guó)小蠊后，隨著傳代次數(shù)增加，德國(guó)小蠊對(duì)DDVP納米乳劑的抗藥性遞增速度比普通乳油要慢。此外本課題初步建立了DDVP乳油作用德國(guó)小蠊后，ApE和1-NA酯酶活性與抗性系數(shù)的相關(guān)方程，為德國(guó)小蠊抗藥性生化檢測(cè)提供了依據(jù)。本次研究中由于德國(guó)小蠊對(duì)DDVP納米乳劑尚未產(chǎn)生抗藥性，因此尚不能建立DDVP納米乳劑的抗性酶與抗性系數(shù)之間的相關(guān)方程。 本研究通過(guò)對(duì)比DDVP納米乳劑和DDVP普通乳油的殺蟲(chóng)毒力，兩者的施藥