新城疫病毒玉林株的分離鑒定與油乳劑滅活疫苗的研制.pdf

1、新城疫是由新城疫病毒引起禽類的急性、高度接觸性、烈性傳染病，對(duì)養(yǎng)禽業(yè)危害極大。我國(guó)對(duì)雞新城疫的主要防制措施是用活疫苗和LaSota油苗進(jìn)行免疫，產(chǎn)生ND抗體而抵御雞新城疫的發(fā)生。據(jù)資料表明，現(xiàn)在許多地方都有非典型新城疫發(fā)生，這除了一部分是由于免疫方法、免疫程序不夠科學(xué)合理外，其他多數(shù)可能是由于疫苗毒株與當(dāng)?shù)亓餍卸局甑幕虿町悓?dǎo)致免疫保護(hù)不夠充分而引起的。本研究就本地流行毒株進(jìn)行分離鑒定和油乳劑滅活疫苗的研制工作。 本研究從廣西玉

2、林市某養(yǎng)雞場(chǎng)分離到四株新城疫毒株，通過(guò)對(duì)這四株分離株進(jìn)行F基因克隆和序列分析、動(dòng)物致病性試驗(yàn)、分子生物學(xué)特性鑒定，測(cè)定YL03的ELD<,50>為10<'-8.5>/0.1mL；MDT為42h；ICPI為1.89；對(duì)雞、鴨、鵝等家禽和部分野禽有100％的致死率；YL02、YK03、YL04的F基因裂解位點(diǎn)氨基酸序列為<'112>R-R-Q-K-R-F<'117>，與新城疫強(qiáng)毒株F基因裂解位點(diǎn)氨基酸序列<'112>R/K-R-Q-K/R-

3、R-F<'117>的特征相符；且這三個(gè)分離株101位為K和121位為V這兩個(gè)特征性氨基酸，綜合以上數(shù)據(jù)表明這三個(gè)分離株為新城疫F基因Ⅶ型強(qiáng)毒株，這說(shuō)明本地已有Ⅶ型新城疫強(qiáng)毒株的流行。通過(guò)F基因核苷酸和氨基酸序列分析，YL02、YL03、YL04株F基因核苷酸、氨基酸序列與標(biāo)淮毒株F<,45>E<,9>、LaSota疫苗株的同源性都較低，這個(gè)結(jié)果提示我們應(yīng)該針對(duì)當(dāng)?shù)亓餍蠳D毒株進(jìn)行更多的研究，找出防制非典型新城疫的措施。 以分離到

4、的YL03株作為種毒進(jìn)行疫苗的研制，獲得一個(gè)油乳劑滅活疫苗。經(jīng)檢驗(yàn)該疫苗安全、穩(wěn)定性較好。以該疫苗對(duì)本地三黃雞、番鴨進(jìn)行免疫接種，接種3周后分別以YL03毒株和F<,48>E<,9>株攻毒試驗(yàn)，免疫動(dòng)物獲得100％的保護(hù)，而對(duì)照組動(dòng)物則100％死亡，免疫動(dòng)物可抵御不同類型強(qiáng)毒株的侵襲；以四種不同的免疫方法和程序?qū)﹄u進(jìn)行免疫對(duì)比試驗(yàn)表明，YL03株油乳劑滅活苗與新城疫Ⅳ系弱毒苗聯(lián)合使用，使雞獲得充分的粘膜局部免疫和機(jī)體抗體保護(hù)作用，相對(duì)于