微環(huán)境對(duì)心血管系統(tǒng)疾病發(fā)生的影響機(jī)制研究.pdf

1、工學(xué)博士學(xué)位論文微環(huán)境對(duì)心血管系統(tǒng)疾病發(fā)生的影響機(jī)制研究杜智敏哈爾濱工業(yè)大學(xué)2007年12月哈爾濱工業(yè)大學(xué)III摘要探討微環(huán)境改變對(duì)心血管系統(tǒng)疾病的影響，確定在高糖環(huán)境下O2●的生成部位；研究O2●對(duì)Kv通道功能的影響；揭示微環(huán)境改變（缺血、缺氧、pH值改變）及外界物質(zhì)對(duì)心肌細(xì)胞Ito的作用機(jī)制。應(yīng)用化學(xué)毒物STZ建立穩(wěn)定糖尿病動(dòng)物模型和的組織細(xì)胞培養(yǎng)模型；采用熒光成像技術(shù)、免疫組織化學(xué)技術(shù)確定在糖尿病微環(huán)境下大鼠冠狀小動(dòng)脈O2●生成部

2、位；用離體小動(dòng)脈灌流技術(shù)研究在高糖環(huán)境下冠狀小動(dòng)脈血管壁的舒縮功能及異丙腎上腺素、福斯克林和4－AP對(duì)小冠狀動(dòng)脈的影響；應(yīng)用膜片鉗技術(shù)研究在高糖環(huán)境下血管平滑肌細(xì)胞Kv通道功能的變化，結(jié)合Westernblot技術(shù)，研究高糖環(huán)境對(duì)Kv通道的影響；確立O2●與Kv通道的關(guān)系；應(yīng)用電生理技術(shù)研究犬心肌細(xì)胞跨膜離子流Ito在微環(huán)境改變時(shí)的變化及各種外界物質(zhì)如烏頭堿、哇巴因等對(duì)Ito的影響，尋找調(diào)節(jié)微環(huán)境并使之保持穩(wěn)態(tài)的物質(zhì)。本文證實(shí)化學(xué)毒物S

3、TZ可致大鼠高血糖，動(dòng)物體重為191～220g，日照8h大鼠成模率高，為87.5%；糖尿病環(huán)境大鼠冠狀小動(dòng)脈內(nèi)皮組織、外膜組織和平滑肌組織O2●生成量均增加；高糖環(huán)境培養(yǎng)大鼠冠狀小動(dòng)脈24h僅內(nèi)皮組織O2●生成量增加；單純?cè)诟咛黔h(huán)境培養(yǎng)的冠狀小動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞O2●生成量不增加。說(shuō)明在短期高糖環(huán)境下O2●只生成于內(nèi)皮組織。高糖環(huán)境抑制了Kv開放，降低了Kv1.2和Kv1.5通道的蛋白表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞膜去極化介導(dǎo)的血管舒張減弱，其作用與K濃度

4、、KATP通道、Ca2通道及去內(nèi)皮的環(huán)境無(wú)關(guān)，是由抑制cAMP信號(hào)系統(tǒng)引起的。氧自由基清除劑可明顯改善糖尿病環(huán)境大鼠小冠狀動(dòng)脈的收縮功能，對(duì)冠狀動(dòng)脈血管平滑肌收縮與舒張有重要調(diào)節(jié)作用。心肌微環(huán)境改變對(duì)Ito的影響與心肌缺血、心律失常、心功不全有密切關(guān)系。在單細(xì)胞水平應(yīng)用心臟毒素烏頭堿和哇巴因可致心臟微環(huán)境改變，引起Ito的變化?；瘜W(xué)物質(zhì)RP58866和RP62719在較低濃度(1、10molL1)對(duì)Ito有明顯的影響，其效價(jià)高于已知的同