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文檔簡介
1、小型豬復合麻醉劑(XFM)是課題組根據(jù)小型豬的生理特點和平衡麻醉理論,研制出的一種小型豬專用的復合麻醉劑,具有麻醉誘導時間短、麻醉維持時間適宜、副作用小的優(yōu)點。替來他明和曲馬多作為XFM的成份之一,均作用于動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng),并且都具有確實的鎮(zhèn)痛效果。最新的研究證明:LKB1-AMPK-mTOR信號轉導通路中的關鍵蛋白參與了機體疼痛和神經(jīng)元興奮性的調節(jié),推測LKB1-AMPK-mTOR信號轉導通路可能參與了麻醉的鎮(zhèn)痛調控。所以本實驗通過
2、給大鼠腹腔注射生理鹽水、鹽酸替來他明和鹽酸曲馬多,利用分子生物學技術檢測藥物注射后不同時間中樞神經(jīng)系統(tǒng)(大腦皮層、海馬、丘腦、小腦、腦干)中LKB1-AMPK-mTOR信號通路的關鍵蛋白基因的轉錄量和蛋白的磷酸化水平,進而探討他們的鎮(zhèn)痛機制,從而推測XFM的全麻鎮(zhèn)痛機理。
將54只SD大鼠隨機分為對照組(n=6)、麻醉組(n=24)和鎮(zhèn)痛組(n=24)。各組大鼠分別腹腔注射生理鹽水、鹽酸替來他明或鹽酸曲馬多后,對照組大鼠在注射
3、生理鹽水后10 min頸椎脫臼處死,麻醉組和鎮(zhèn)痛組根據(jù)注射藥物后10 min、20 min、40 min和60 min分為四個亞組(n=6),分別在相應時間點頸椎脫臼處死,并迅速采集大腦皮層、海馬、丘腦、小腦和腦干部位,利用RT-PCR檢測樣品中LKB1 mRNA、AMPKα1 mRNA、AMPKα2 mRNA和4EBP1mRNA的相對轉錄量,利用Western-blot方法檢測各樣品p-LKB1/LKB1、p-AMPK/AMPK和p-
4、4EBP1/4EBP1蛋白磷酸化水平。
實驗結果表明:
(1)替來他明和曲馬多能使LKB1 mRNA、AMPKα1 mRNA和AMPKα2 mRNA的轉錄量極顯著性升高(p<0.01),而抑制4EBP1 mRNA的轉錄量(p<0.01)。
(2)替來他明和曲馬多能促進LKB1和AMPK的磷酸化水平(p<0.01),相反抑制了4EBP1的磷酸化水平(p<0.01)。
(3)在大鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,替
5、來他明和曲馬多在海馬、丘腦、小腦以及腦干區(qū)表現(xiàn)出高效的調節(jié)作用,且多為藥物注射后的20 min和40 min。
綜上,實驗得出結論:LKB1-AMPK-mTOR信號轉導通路參與了替來他明和曲馬多的麻醉、鎮(zhèn)痛調節(jié),而大鼠的海馬、小腦、丘腦、腦干可能是LKB1-AMPK-mTOR信號通路參與麻醉與鎮(zhèn)痛的靶位;通過激活LKB1-AMPK-mTOR信號通路作用于該藥物相對應的靶蛋白上產(chǎn)生麻醉、鎮(zhèn)痛作用可能是替來他明和曲馬多的作用機制,
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