咯利普蘭對(duì)體外循環(huán)時(shí)炎癥反應(yīng)影響的研究.pdf

1、體外循環(huán)(caurdiopulmonary bypass,CPB)初期,手術(shù)創(chuàng)傷等機(jī)械刺激所引起的適度炎癥反應(yīng)是機(jī)體的一種保護(hù)性措施,可起到對(duì)抗感染和修復(fù)損傷組織的作用.然而,隨著手術(shù)時(shí)間延長(zhǎng),由于腸道細(xì)菌移位、缺血一再灌注等引起的"二次打擊,,使得炎癥反應(yīng)加劇甚至失控,大量炎癥介質(zhì)和酶類釋放,氧自由基產(chǎn)生、內(nèi)毒素釋放入循環(huán)系統(tǒng),影響器官正常功能,甚至導(dǎo)致或加速單個(gè)或多個(gè)器官功能不全或衰竭的發(fā)生.現(xiàn)階段越來(lái)越多的研究認(rèn)為泛濫的炎癥介質(zhì)為

2、CPB時(shí)炎癥反應(yīng)的主要因素.由于細(xì)胞因子是以級(jí)聯(lián)反應(yīng)形式釋放,具有網(wǎng)絡(luò)性特點(diǎn),因此,只在蛋白水平阻斷一種細(xì)胞因子效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能達(dá)到預(yù)期目標(biāo).現(xiàn)己證明NF-κB通過(guò)參與多種細(xì)胞因子基因的轉(zhuǎn)錄而對(duì)這一調(diào)控網(wǎng)絡(luò)產(chǎn)生復(fù)雜的影響. 作為神經(jīng)遞質(zhì)、激素和光等物質(zhì)的第二信使,環(huán)磷酸腺苷(cAMP)主要通過(guò)依賴cAMP的蛋白激酶(PKA)途徑行使其第二信使功能. cAMP受腺苷酸環(huán)化酶合成和磷酸二酯酶(PDE)分解的雙重調(diào)節(jié).其中PDE-4具有cAMP特

3、異性且主要分布于體內(nèi)各種炎性細(xì)胞內(nèi). PDE-4抑制劑咯利普蘭現(xiàn)階段主要用在老年癡呆,抑郁癥及慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstmctive Pulmonary Disease,COPD)的研究.在心血管外科方向的研究,國(guó)內(nèi)外尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)這方面的報(bào)道,本實(shí)驗(yàn)采用大鼠的體外循環(huán)模型,研究選擇性磷酸二酯酶抑制劑(PDE4)咯利普蘭對(duì)體外循環(huán)時(shí)炎癥反應(yīng)的影響,探討其對(duì)炎癥反應(yīng)的影響機(jī)制. 方法；清潔健康大鼠(300g左

4、右,雌雄不拘)30只,隨機(jī)分為對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組.氣管切開插管,呼吸機(jī)輔助呼吸,大鼠全身肝素化,經(jīng)右頸動(dòng)脈逆行插入動(dòng)脈灌注管.經(jīng)左頸靜脈穿刺靜脈引流管直至右心房水平,經(jīng)變溫水箱變溫,氧合器氧合后通過(guò)血泵灌入左頸動(dòng)脈建立體外循環(huán)模型,術(shù)中轉(zhuǎn)流灌注流量約為45.55ml·kg<'-1>·-min<'-1>.實(shí)驗(yàn)組,術(shù)前半小時(shí)腹腔注射咯利普蘭稀釋液10ml/kg,術(shù)中經(jīng)股靜脈以40microg/kg/min持續(xù)滴入咯利普蘭稀釋液,對(duì)照組(C組)則

5、應(yīng)用同樣的方法給予等量的5﹪乙醇生理鹽水.于轉(zhuǎn)流開始,轉(zhuǎn)流20min,停CPB后5min和2h四個(gè)時(shí)點(diǎn)分別取靜脈血0.5-1ml,立即離心并凍存血漿.采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定血漿中腫瘤壞死因子(TNF-a)濃度,采用鱟試劑酶反應(yīng)顯色法測(cè)定血漿中內(nèi)毒素(LPS)水平,采用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測(cè)肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞P-選擇素的表達(dá),取肺組織標(biāo)本制片進(jìn)行HE染色,光鏡下觀察組織學(xué)改變,根據(jù)其組織病理表現(xiàn)評(píng)估肺的微觀改變和肺損傷.

6、 結(jié)果；2 (1)TNF-a,LPS在CPB轉(zhuǎn)流中及轉(zhuǎn)流后水平明顯高于CPB前,其中TNF-a,LPS在轉(zhuǎn)流20min至再灌注后5min這一時(shí)間段內(nèi)升高幅度最大.(2)轉(zhuǎn)流20min、停CPB后5min和2h,實(shí)驗(yàn)組TNF-a較對(duì)照組分別減少了62.73﹪(p<0.05)、72﹪(p<0.05)和69.65﹪(p<0.01),實(shí)驗(yàn)組LPS較對(duì)照組分別減少了80﹪(p<0.05)、6.4.86﹪(p<0.01)、67.1.6﹪(P<0.