樹突狀細(xì)胞及其Toll樣受體3在重型乙型肝炎中的作用研究.pdf

1、第一部分，重型乙型肝炎患者外周血樹突狀細(xì)胞頻率、表型、功能變化
　　背景與目的:
　　DC是專職的抗原提呈細(xì)胞,是連接天然免疫與獲得性免疫的橋梁,是平衡免疫應(yīng)答與免疫耐受的關(guān)鍵。作為免疫系統(tǒng)的前沿哨兵,受到病原體或炎癥信號(hào)的刺激后,DCs進(jìn)行復(fù)雜的成熟過程,從而影響免疫應(yīng)答的質(zhì)與量。本研究旨在觀察重型乙型肝炎(ACLF)患者外周血樹突狀細(xì)胞兩個(gè)亞群(mDC和pDC)的頻率,單核細(xì)胞衍生的樹突狀細(xì)胞(MoDC)表型及刺激同種異

2、體T淋巴細(xì)胞增殖能力的變化。
　　方法:
　　篩選重型乙型肝炎(ACLF)患者60例,慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者40例,并以20例健康者作對(duì)照,取入選研究對(duì)象的抗凝全血,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血循環(huán)中mDC和pDC分別占外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的比例。抗凝全血通過淋巴細(xì)胞分離液進(jìn)行密度梯度法離心,分出PBMC,并進(jìn)一步經(jīng)免疫磁珠陽性選擇的方法分離單核細(xì)胞,細(xì)胞因子白介素4和粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子體外誘導(dǎo)為MoD

3、C,經(jīng)poly(I:C)刺激后,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)MoDC的表型(HLA-DR、CD83、CD80、CD86),并通過同種混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)檢測(cè)MoDC刺激同種異體T淋巴細(xì)胞增殖的能力。
　　結(jié)果:
　　1、健康對(duì)照組mDC和pDC占PBMC百分率分別為0.52％±0.04％和0.31％±0.02％;CHB組mDC和pDC占PBMC的百分率分別為0.53％±0.11％和0.2％±0.03％;ACLF組mDC和pDC占P

4、BMC的百分率分別為0.18％±0.02％和0.15％±0.02％。ACLF組mDC占PBMC的百分率較CHB組及健康對(duì)照組均明顯降低(P＜0.001),但CHB組與健康對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.927)。與健康對(duì)照組相比,ACLF組和CHB組。pDC的百分率均顯著降低(P＜0.001),但ACLF組和CHB組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.113)。
　　2、經(jīng)poly(I:C)刺激后健康對(duì)照組MoDC表面MHCⅡ類分子HL

5、A-DR、成熟的標(biāo)志CD83及協(xié)同刺激分子CD86和CDS0平均熒光強(qiáng)度的表達(dá)分別為302.1±5.6、205.1±13.7、346.7±14.6、38.8±1.0;CHB組HLA-DR、CD83、CD86和CD80表達(dá)分別為272.2±3.38、173.0±6.4、315.5±7.93、30.6±0.57;ACLF組HLA-DR、CD83、CD86和CD80表達(dá)分別為223.0±5.5、148.2±6.1、219.1±7.1、25.0