艾塞那肽對棕櫚酸作用下大鼠胰島β細胞FTO表達及氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、背景：
　　最新調(diào)查顯示，我國糖尿病(diabetic mellitus，DM)患病率約為11.6％，是繼腫瘤及心腦血管疾病后第三位威脅國人健康的非傳染性重大疾病。研究證實，脂毒性是2型糖尿病(T2DM)發(fā)病的重要機制之一，由高脂導(dǎo)致氧化應(yīng)激增強是胰島β細胞脂性凋亡的基本途徑。眾所周知，肥胖是T2DM未來風(fēng)險的主要預(yù)測因子，而在脂肪代謝中起著重要作用的肥胖相關(guān)基因(fatmassandobesity-associatedgene，

2、FTO)，則被作為兩者的共同分子途徑受到人們的關(guān)注。既往研究發(fā)現(xiàn)，高脂飲食可誘導(dǎo)大鼠肝細胞FTO的表達增加，那么棕櫚酸作用下胰島β細胞的FTO表達是否也會增加呢？胰高血糖素樣肽-1（glucagon-likepeptide-1，GLP-1）做為新型降糖藥應(yīng)用于臨床的同時觀察到其有抗氧化應(yīng)激、抗凋亡的作用，目前已成為研究的熱點，但是其具體分子機制尚未完全闡明。磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路是目前所知較重要的抗凋亡通路

3、。GLP-1受體激動劑艾塞那肽(Exenatide)是否通過PI3K/Akt通路改善高脂引起的胰島β細胞氧化應(yīng)激損傷，并下調(diào)FTO表達，目前國內(nèi)外未見相關(guān)報道。
　　目的：
　　探討(1)棕櫚酸(palmiticacid，PA)對大鼠胰島β細胞(INS-1)FTO表達的影響;(2)艾塞那肽對高脂誘導(dǎo)的β細胞FTO表達、氧化應(yīng)激的影響及其可能機制。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)大鼠胰島β細胞INS-1，實驗分兩部分。第

4、一部分共分4組:①正常組:培養(yǎng)液中未加棕櫚酸;②PA0.125組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.125mmol/L;③PA0.25組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.25mmol/L;④PA0.5組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.5mmol/L。第二部分共分5組:①正常組:培養(yǎng)液中未加棕櫚酸;②正常+艾塞那肽組:培養(yǎng)液中未加棕櫚酸，艾塞那肽濃度為10nmol/L;③高脂組:培養(yǎng)液中棕櫚酸濃度為0.5mmol/L;④高脂+艾塞那肽組:培養(yǎng)液棕櫚酸濃度為0.5mmo

5、l/L，艾塞那肽濃度為10nmol/L;⑤高脂+艾塞那肽+PI3K抑制劑組:高脂培養(yǎng)液中加入濃度為10nmol/L的艾塞那肽及濃度為50μmol/L的PI3K抑制劑LY294002。其中，PA、Exenatide及PI3K抑制劑LY294002的濃度均是由預(yù)實驗結(jié)果而確定的。以上各組細胞均在相同環(huán)境下培養(yǎng)48h，酶標(biāo)儀法檢測并計算出第二部分5組細胞上清液中的丙二醛(malondialdehyde，MDA)、還原型谷胱甘肽（glutath

6、ione，GSH）水平;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測各組細胞FTOmRNA的表達情況。統(tǒng)計學(xué)軟件采用SPSS17.0。
　　結(jié)果：
　　1、與正常組比較，不同濃度的棕櫚酸作用下FTOmRNA的表達量均顯著增加（P＜0.01）。其中，與PA0.125組、PA0.25組比較，PA0.5組的FTO的表達顯著升高（P＜0.01）;而PA0.25與PA0.125組比較，差異并無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2、

7、與正常組比較，正常+艾塞那肽組FTO表達及MDA、GSH水平均無變化（P＞0.05）;高脂組FTO表達、MDA水平顯著升高，GSH水平顯著降低(P＜0.01)。
　　3、與高脂組比較，高脂+艾塞那肽組FTO表達、MDA水平顯著降低，GSH水平顯著升高（P＜0.01）。
　　4、與高脂+艾塞那肽組比較，高脂+艾塞那肽+PI3K抑制劑組FTO表達、MDA水平顯著升高，GSH水平顯著降低(P＜0.01)。
　　結(jié)論：