紅花對肺缺血再灌注損傷保護效應(yīng)及其機制.pdf

1、目的：探討紅花對肺缺血再灌注損傷保護作用及其可能的機制。 方法：健康日本大耳白兔隨機分成3組，每組10只，假手術(shù)組(shamoperation，S組)，肺缺血再灌注組(ischemiareperfusion，IR組)，缺血再灌注+紅花注射液組(safflorinjection，SI組)。麻醉后左側(cè)開胸，游離肺門，穿過阻斷帶，復(fù)制在體原位單肺缺血再灌注模型。S組左肺門過阻斷帶后不阻斷肺門；IR組左肺門過阻斷帶后阻斷左肺門缺血1h，

2、松開阻斷帶再灌注3h：SI組分別在缺血前20min和再灌注即刻靜注紅花注射液，其余同IR組。各組在缺血前、缺血后、再灌注1h、2h和3h分別經(jīng)頸總動脈抽血檢測黃嘌呤氧化酶(XO)和超氧化物歧化酶(SOD)活力，丙二醛(MDA)含量，實驗結(jié)束時取肺組織測濕干重比；光鏡觀察肺組織形態(tài)學(xué)改變及計數(shù)肺泡損傷率(IQA)；電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變。應(yīng)用免疫組化法檢測肺組織COX-1、COX-2蛋白表達(dá)，原位雜交法檢測肺組織COX-1mRNA和C

3、OX-2mRNA表達(dá)的變化。 結(jié)果：1.IR組、SI組血漿XO活力均隨著缺血和再灌注時間的延長而逐漸上升，但SI組比IR組上升緩慢。 2.IR組血漿SOD活力隨缺血和再灌注時間的延長而逐漸下降；SI組這種下降的程度較為緩和。 3.IR組、SI組血漿MDA含量均隨缺血和再灌注時間的延長而逐漸上升，但SI組比IR組上升緩慢。 4.肺濕干重比與肺泡損傷率IR組明顯高于S組(P＜0.01)，SI組雖然較S組為高，

4、但明顯低于IR組(P＜0.01)。 5.光鏡觀察：S組肺間質(zhì)及肺泡結(jié)構(gòu)保持完整，無明顯受損，未見明顯炎性細(xì)胞；IR組可見肺不張伴肺氣腫，肺間質(zhì)增寬水腫，炎癥細(xì)胞浸潤，肺泡內(nèi)可見較多紅細(xì)胞滲出，損傷明顯；SI組肺間質(zhì)水腫程度減輕，炎癥細(xì)胞浸潤減少，肺泡內(nèi)紅細(xì)胞滲出減少，肺泡較完整。 6.電鏡觀察：S組毛細(xì)血管，肺泡Ⅰ型，Ⅱ型上皮結(jié)構(gòu)正常。IR組肺內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，可見核染色質(zhì)聚集并靠核膜周邊分布，胞核固縮傾向，核間隙

5、增大，Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)吞飲小泡較少，Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表面微絨毛減少，線粒體腫脹，板層小體稀少，出現(xiàn)較多空泡，肺泡隔水腫，肺泡隔及毛細(xì)血管內(nèi)炎癥細(xì)胞附壁，以中性粒細(xì)胞為主。與IR組作對比觀察，SI組毛細(xì)血管和肺泡結(jié)構(gòu)有所改善，毛細(xì)血管內(nèi)炎癥細(xì)胞減少，染色質(zhì)分布較均勻，Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞內(nèi)吞飲小泡較多，Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞表面微絨毛及板層小體增多，肺泡隔輕度水腫。 7.免疫組化和原位雜交均發(fā)現(xiàn)IR組、SI組肺組織COX-2蛋白和COX-