石蒜凝集素的純化、性質(zhì)及構象研究;單子葉石蒜科植物朱頂紅和風雨花甘露糖結合凝集素基因的克隆及序列分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該文對石蒜凝集素的研究主要包括純化、性質(zhì)、活性以及結構幾個方面.石蒜(Lycoris radiata)球莖經(jīng)勻漿、浸取、硫酸銨分級沉淀得到粗品,將粗品過陽離子交換柱(CM-Sepharose)、陰離子交換柱(DEAE-Sepharose)和SephacrylS-100分子篩層析得到凝集素純品.經(jīng)SDS-PAGE檢測為單一蛋白帶,亞基分子量為12KD,SephacrylS-100凝膠過濾測得其表觀分子量為45KD,表明LRA是由四個相同亞

2、基組成的蛋白.LRA能凝集兔血細胞和大腸桿菌,其凝集兔血細胞和大腸桿菌細胞的效價分別為0.95ug/mL和1.9ug/mL,對外周血淋巴細胞具有很強的促有絲分裂能力;糖抑制實驗結果表明,甘露聚糖和甲狀腺球蛋白能抑制LRA的凝血活性;對酵母細胞的凝集實驗表明,LRA能凝集啤酒酵母細胞;在抗病毒活性方面,LRA能有效地降低II型人類單純皰疹病毒(HSV-II)對Vero細胞(非洲綠猴腎細胞)的感染,在500ug/mL時對正常Vero細胞無細

3、胞毒性,IC<,50>=5~10ug/mL之間.在抗愛滋病病毒實驗中,LRA能有效降低HIV-1和HIV-2對HT-4和CEM細胞的感染,LRA對HIV-1的半抑制濃度EC<,50>分別為0.43ug/mL和0.79ug/mL,對HIV-2的EC<,50>分別為0.60ug/mL和0.59ug/mL,而LRA對HT-4和CEM的半數(shù)細胞毒性濃度為71ug/mL,表明LRA是一種有效的抗病毒蛋白.研究了不同溫度、pH和特異化學修飾后LRA

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