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1、目的:本研究制備液氮冷凍股骨頭缺血性壞死的動(dòng)物模型,切除股骨頭壞死部分并轉(zhuǎn)移自體帶血管蒂的大轉(zhuǎn)子骨瓣進(jìn)行股骨頭再造,于術(shù)后不同時(shí)間段觀察分析大轉(zhuǎn)子骨瓣表面骨膜及腱膜等纖維結(jié)締組織向關(guān)節(jié)軟骨轉(zhuǎn)化的規(guī)律及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)在軟骨化生過(guò)程中發(fā)揮的生物學(xué)作用。方法:取8~12個(gè)月齡的比格犬40只,體重7~10kg,均采用雙側(cè)后肢自體對(duì)照,制備液氮冷凍雙側(cè)股骨頭缺血性壞死的動(dòng)物模型,隨機(jī)分為二組,每組20只。右側(cè)股骨頭造模后即縫合
2、關(guān)節(jié)囊,左側(cè)股骨頭根據(jù)分組不同采用不同的處理方式:A組(骨瓣治療組):左側(cè)切除股骨頭液氮冷凍壞死區(qū)域后轉(zhuǎn)移帶旋股外側(cè)血管橫支血管蒂大轉(zhuǎn)子骨瓣進(jìn)行股骨頭再造;B組(骨瓣加rAAV2-TGF-β1基因治療組):左側(cè)股骨頭帶血管蒂大轉(zhuǎn)子骨瓣股骨頭再造,關(guān)節(jié)內(nèi)注入表達(dá)TGF-β1的腺病毒載體;兩組動(dòng)物分別于3,6,12,20,32周每批4只處死,對(duì)骨瓣進(jìn)行大體觀察,組織病理學(xué)觀察,免疫組化及實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCRmRNA檢測(cè)。結(jié)果:所有動(dòng)物右
3、側(cè)冷凍區(qū)組織壞死,纖維狀物覆蓋,碎片樣組織修復(fù)。組織病理切片及Ⅰ,Ⅱ型膠原蛋白的免疫組化證實(shí)A組左側(cè)骨瓣區(qū)自6周出現(xiàn)軟骨細(xì)胞,且逐周增多,B組左側(cè)骨瓣區(qū)自3周出現(xiàn)軟骨細(xì)胞,RT-PCRmRNA檢測(cè)均為陽(yáng)性表達(dá),隨時(shí)間推遲陽(yáng)性表達(dá)越強(qiáng)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:大轉(zhuǎn)子表面的骨膜及腱膜能夠向關(guān)節(jié)軟骨化生,TGF-β1基因可陽(yáng)性表達(dá),TGF-β1對(duì)大轉(zhuǎn)子表面的骨膜及腱膜向關(guān)節(jié)軟骨化生有促進(jìn)作用,為股骨頭缺血性壞死的纖維外科治
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