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文檔簡介
1、前言:外傷或疾病引起的關節(jié)軟骨損傷在臨床上很常見,但軟骨組織中不具有血管與神經(jīng),其損傷后不易自我修復.對于關節(jié)軟骨損傷的修復在目前的骨科臨床、基礎研究中仍是一個重要的課題.如何體外大量擴增得到數(shù)量足夠的自體軟骨細胞以進行關節(jié)軟骨缺損的組織工程方法修復是目前實驗研究的重點.但以往的實驗研究對象大多為胎兔或幼兔關節(jié)軟骨細胞,其增殖能力明顯好于成年兔.臨床上關節(jié)軟骨損傷或嚴重骨關節(jié)炎的患者多為老年或成年人,其自我修復能力極差,以往研究對此是不
2、適用的.許多研究表明,生物活性因子在關節(jié)軟骨的損傷、修復機制中,起著重要的調節(jié)作用.許多生長因子促進軟骨細胞增殖和基質表達已被證實.其中,TGF-β<,1>就是一個重要的因子.我們以成兔的關節(jié)軟骨細胞為對象,研究了TGF-β<,1>對其增殖和特異性基質合成的促進作用,為成人關節(jié)軟骨細胞的體外培養(yǎng)擴增提供理論和臨床依據(jù).材料與方法:1.成年兔關節(jié)軟骨細胞分離、培養(yǎng):取18月齡的成年日本大耳白兔1只,處死,片狀切取關節(jié)軟骨,解剖刀將軟骨切成
3、1.0mm<'3>大小碎塊,消化,過濾,離心,收集關節(jié)軟骨細胞,加入DMEM培養(yǎng)液(含20%胎牛血清、青霉素100U/ml,鏈霉素100U/ml),調整細胞密度為2.5×10<'5>/ml,置于37℃,5%CO<,2>孵育箱內(nèi)培養(yǎng).2.倒置顯微鏡下觀察軟骨細胞生長狀況.3.細胞爬片HE染色光鏡下觀察軟骨細胞形態(tài).4.MTT比色試驗測定軟骨細胞存活數(shù)及TGF-β<,1>促進其增殖的最佳濃度.5.細胞計數(shù)繪制生長曲線觀察在TGF-β<,1>
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