配伍紅花籽油增強腦細胞及其線粒體對自由氧基介導的細胞損傷的抵抗機制研究.pdf

1、目的：①制備由α-亞麻酸和亞油酸按不同比例混合而成的標準配伍紅花籽油；②建立H2O2誘導的腦細胞(PC12細胞株)損傷(凋亡)模型及研究配伍紅花籽油增強腦細胞抵抗自由氧基介導的細胞損傷的機制；③利用H2O2/Fe2+誘導的線粒體損傷體系研究配伍紅花籽油抑制脂質(zhì)過氧化的能力。 方法：①制備配伍紅花籽油并利用GC(氣相色譜法)法測定α-亞麻酸和亞油酸含量；②建立H2O2誘導的PC12細胞凋亡模型，利用MTT法、流式細胞技術(shù)及熒光成像

2、技術(shù)等方法對不同濃度的配伍紅花籽油(0.5％DMSO溶液)藥物干預(yù)進行分析，確定PC12細胞的活力和量效關(guān)系；③用改良的Clark技術(shù)提取大鼠腦線粒體，建立H2O2/Fe2+氧化損傷體系，檢測配伍紅花籽油藥物干預(yù)前后的線粒體褐脂質(zhì)、膜的流動性、ATPase活性、膨脹度等指標變化。 結(jié)果：①利用本實驗方法提取的混合十八碳二、三烯酸中α-亞麻酸(ALA)、亞油酸(LA)的含量分別達62.49％和22.91％，滿足配伍紅花籽油的要求；

3、②H2O2誘導細胞損傷(凋亡)的最低濃度為200μM，配伍紅花籽油對腦細胞(PC12細胞)抵抗自由氧基損傷產(chǎn)生作用的最低濃度為0.3mg/ml；③配伍紅花籽油濃度在0.3-0.5mg/ml時，可以明顯提高線粒體抑制脂質(zhì)過氧化的能力，從而改善線粒體膜流動性、膨脹度和ATP酶(ATPase)活性。 結(jié)論：①提取與制備配伍紅花籽油的方法具有可重復(fù)性和可行性；②H2O2誘導的細胞損傷模型可以用于配伍紅花籽油的細胞藥物干預(yù)試驗，而且具有可