多維色譜法分析毛白楊次生維管系統(tǒng)再生過程的蛋白質表達譜.pdf

1、中國彝耋蟹學坼憲葩學位論文多維色譜法分析毛白楊次生維管系統(tǒng)再生過程的蛋白質表達譜申請學位級別指導教師論文完成實驗室論文答辯日期陳軍博士聲孟拄(研究員、博士)林業(yè)所生物技術重點實驗室2006年06月28日⑧中國北京在次生維管系統(tǒng)再生的初期，細胞開始脫分化，并且形成大量愈傷組織，細胞分裂旺盛。與細胞周期及細胞分裂相關的28個蛋白中，有65％集中在這一時期內大量表達。在次生維管系統(tǒng)再生的中期，主要是形成層的形成及分化。這一過程涉及形成層的形成

2、和維持，韌皮部及木質部原始細胞、母細胞的分裂分化，維管束發(fā)育的徑向模式調控等，因此代謝活動旺盛，各種信號轉導和轉錄因子非常活躍，調控基因表達譜的轉變。在這一時期，共發(fā)現(xiàn)了9種與生長素信號傳遞相關的蛋白，5種與乙烯信號傳遞相關的蛋白和一種赤霉素信號傳遞相關的蛋白另外，還發(fā)現(xiàn)4個鈣調素及鈣調磷酸酶，2個G蛋白等多種下游信號傳遞物及第二信使。在次生維管系統(tǒng)再生的后期，各種組織已基本形成，細胞次生壁開始加厚。這一時期共發(fā)現(xiàn)8種纖維素及木質素合成

3、相關酶類，1種果膠酯酶和1種半乳糖基轉移酶，以及3種還未經證實的胞壁合成相關酶類。因此基因的特異表達與維管組織再生進程相一致，這為進一步揭示它們在木材形成過程中的作用奠定了基礎。分別進行了11種蛋白相應編碼基因的表達模式和表達水平分析，結果顯示其中有8個基因的mRNA表達模式與蛋白質表達模式一致：2個基因的mRNA表達與蛋白質表達雖然模式一致，但mRNA水平的變化不明顯；另外1個基因的mRNA表達與蛋白質表達模式完全不一致。這顯示多數(shù)基

4、因的表達在KNA水平和蛋白水平相一致，但部分基因的表達調控主要不在mRNA水平上，還受到翻譯水平及翻譯后修飾的調控。也說明mRNA的水平不一定反映出基因的表達水平，因此直接對參與生物學過程的蛋白質分析更加重要。本研究不但建立了一套針對楊樹發(fā)育中的維管組織蛋白質的液相色譜分離及質譜鑒定的技術體系，而且找到了眾多可能參與木材形成相關的蛋白質及其編碼基因，可作為分離、鑒定決定木材形成關鍵基因的候選基因，為木材材性改良的基因工程育種提供了理論基