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1、目的:觀察不同劑量牛磺酸對(duì)S180移植瘤小鼠的影響,并初步探討其可能的作用機(jī)制。 方法:60只昆明小鼠隨機(jī)分為?;撬岬?、中、高劑量組(分別在飲水中添加0.5%,1.0%,1.5%的?;撬幔籼炫渲?、環(huán)磷酰胺組(隔天腹腔注射環(huán)磷酰胺20mg/kg.bw)、對(duì)照組5組。牛磺酸干預(yù)一周后,各組小鼠左前肢腋窩皮下均接種S180細(xì)胞懸液0.2ml,24h后,環(huán)磷酰胺組腹腔注射環(huán)磷酰胺20mg/(kg.bw)。第11天處死小鼠,稱取瘤重、
2、脾臟及胸腺的重量,計(jì)算抑瘤率、脾臟及胸腺指數(shù);測(cè)定血漿、肝臟超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性、丙二醛的(MDA)含量;采用H2O2誘發(fā)氧化溶血實(shí)驗(yàn)檢測(cè)紅細(xì)胞的溶血度;采用單細(xì)胞凝膠電泳(SCGE)技術(shù)檢測(cè)血淋巴細(xì)胞的DNA自發(fā)及誘導(dǎo)氧化損傷;采用HE染色和免疫組化法觀察腫瘤組織的病理形態(tài)學(xué)變化和凋亡相關(guān)基因bcl-2和bax蛋白的陽性表達(dá)。 結(jié)果:1. ?;撬岣鲃┝拷M和環(huán)磷酰胺組的平均瘤重明顯低
3、于對(duì)照組(P<0.01);?;撬岬汀⒅袆┝拷M平均瘤重明顯高于環(huán)磷酰胺組(P<0.01)。牛磺酸各劑量組和環(huán)磷酰胺組的抑瘤率分別是31.1%,35.6%,43.0%,51.9%。 2.牛磺酸中劑量組的脾臟指數(shù)和中、高劑量組的胸腺指數(shù)明顯高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01);各劑量組脾臟和胸腺指數(shù)均高于環(huán)磷酰胺組(P<0.01)。 3.與對(duì)照組相比,血漿標(biāo)本的牛磺酸各劑量組SOD活性和中、高劑量組的GSH-Px活性明顯升
4、高(P<0.05或P<0.01),各劑量組MDA含量明顯降低(P<0.01);肝臟中?;撬岬?、中劑量組的SOD活性和中劑量組的GSH-Px活性明顯升高(P<0.01)。與環(huán)磷酰胺組相比,?;撬岣邉┝拷M的血漿MDA含量明顯降低(P<0.05)。 4.?;撬岬汀⒏邉┝拷M的溶血度明顯低于對(duì)照組(P<0.05):各劑量組與環(huán)磷酰胺組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5.牛磺酸各劑量組的淋巴細(xì)胞自發(fā)性損傷低于對(duì)照組和環(huán)磷酰胺
5、組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。用10μmol/L H2O2處理的牛磺酸中、高劑量組和25μmol/L H2O2處理的牛磺酸高劑量組的DNA損傷明顯低于對(duì)照組(P<0.05);10,25μmol/L H2O2處理的?;撬岣鲃┝拷MDNA損傷均明顯低于環(huán)磷酰胺組(P<0.05或P<0.01)。 6.HE染色觀察可見,?;撬岣鲃┝拷M的腫瘤細(xì)胞均出現(xiàn)細(xì)胞皺縮、胞質(zhì)致密、染色質(zhì)邊集等典型的凋亡形態(tài)學(xué)變化。 7.與對(duì)照組相比
6、,?;撬岣鲃┝拷M的bcl-2陽性表達(dá)水平明顯降低(P<0.01)、中和高劑量組的bax陽性表達(dá)水平明顯升高(P<0.05或P<0.01)、各劑量組的bax/bcl-2比例明顯升高(P<0.01);與環(huán)磷酰胺組相比,牛磺酸各劑量組的bcl-2陽性表達(dá)水平較高、bax陽性表達(dá)水平較低、bax/bcl-2比例較低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。 結(jié)論:1.牛磺酸對(duì)S180移植瘤有一定的抑制作用,各劑量組抑瘤率均超過
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