螺內(nèi)酯對糖尿病大鼠足細(xì)胞損傷的影響.pdf

1、目的：糖尿病腎病(DN)是糖尿病(DM)危害最大的微血管并發(fā)癥之一，確切的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。近年來研究發(fā)現(xiàn)，腎小球臟層上皮細(xì)胞，即足細(xì)胞(podocyte)結(jié)構(gòu)改變在糖尿病腎病蛋白尿產(chǎn)生及發(fā)展過程中起重要作用。DN早期即出現(xiàn)足細(xì)胞損傷，進(jìn)一步發(fā)展為蛋白尿，加速腎臟病變進(jìn)展。整合素是足細(xì)胞粘附于腎小球基底膜(GBM)的主要粘附分子，參與維持足細(xì)胞正常形態(tài)、GBM通透性和足細(xì)胞內(nèi)外信號的傳導(dǎo)。足細(xì)胞主要表達(dá)整合素α3β1。醛固酮受體在腎

2、小管和部分腎小球細(xì)胞，包括足細(xì)胞都有表達(dá)，且足細(xì)胞培養(yǎng)液中，也有醛固酮受體mRNA和蛋白的持續(xù)表達(dá)，說明足細(xì)胞是醛固酮作用的靶點(diǎn)之一。醛固酮可以通過影響血流動力學(xué)、上調(diào)活性氧族物質(zhì)(ROS)產(chǎn)生、誘導(dǎo)足細(xì)胞凋亡等機(jī)制參與DN足細(xì)胞損傷。由此可以推測，螺內(nèi)酯作為醛固酮受體拮抗劑能夠拮抗醛固酮作用，保護(hù)足細(xì)胞結(jié)構(gòu)，延緩DN進(jìn)展，而相關(guān)內(nèi)容罕有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察足細(xì)胞整合素α3表達(dá)和尿中足細(xì)胞排泄改變，探討螺內(nèi)酯對DM大鼠腎臟足細(xì)胞損傷的影

3、響，進(jìn)一步明確其對DN保護(hù)性機(jī)制。 方法：選取體重180-220g的雄性Wistar大鼠57只，按體重分層，隨機(jī)分為(1)正常對照組(C組)18只(2)糖尿病模型對照組(D組)21只(3)螺內(nèi)酯治療組(S組)18只。尾靜脈注射STZ，24小時后測血糖，超過16.7mmol/L視為模型復(fù)制成功。之后，S組以40mg/kg/d螺內(nèi)酯灌胃。于實(shí)驗(yàn)第4、8、12周置代謝籠內(nèi)留取24h尿，檢測24h尿微量白蛋白，免疫熒光法定量檢測尿中足細(xì)

4、胞排泄量，免疫組化法了解整合素α3表達(dá)改變。光鏡和電鏡檢查評估腎小球病理改變程度。 結(jié)果：(1)與C組比較，D組和S組大鼠24小時尿微量白蛋白和足細(xì)胞排泄量在4至12周間逐漸增加。與D組比較，S組尿微量白蛋白和足細(xì)胞排泄數(shù)量顯著減少。(2)C組光鏡未見明顯病理改變。D組可見系膜區(qū)增寬及系膜基質(zhì)增多，基底膜增厚。與同期D組相比，S組大鼠腎臟光鏡病理病理改變有所減輕。C組電鏡未見明顯病理改變，D組4周后，出現(xiàn)足突節(jié)段融合，基底膜稍增

5、厚；至12周，病理改變更加明顯，主要表現(xiàn)為足突融合增加，基底膜明顯增厚。與同期D組相比，S組大鼠腎臟電鏡病理改變均有所減輕。(3)C組α3主要在腎小球基底膜線性表達(dá)；D組表達(dá)部位與C組相同，第4周時表達(dá)強(qiáng)度有所減弱，直至12周明顯減弱。S組在各時間段α3表達(dá)強(qiáng)度均高于D組。 結(jié)論：STZ誘導(dǎo)的DM大鼠，早期出現(xiàn)足細(xì)胞損傷，表現(xiàn)為尿中微量白蛋白和足細(xì)胞排泄增加；光鏡病理示系膜區(qū)增寬及系膜基質(zhì)增多，基底膜增厚；免疫組化示整合素α3表