普羅布考對2型糖尿病大鼠足細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的：觀察2型糖尿病對腎小球足細(xì)胞和裂隙膜的影響，并探討其可能機(jī)制和作用，及普羅布考對糖尿病腎病足細(xì)胞和裂隙膜的保護(hù)作用。 方法：雄性SD(sprague-Dawley)大鼠36只，分為兩組，正常對照組(N組，喂養(yǎng)普通飼料10只)和高糖高脂組(M組，喂養(yǎng)高糖高脂飼料26只)，分別喂養(yǎng)8周后，測量血脂、血糖和血胰島素，并計(jì)算HOMA-IR。高糖高脂組喂養(yǎng)的26大鼠只注射STZ(鏈脲佐菌素，30mg/kg)，血糖>16.67mmol

2、/l確定為糖尿病，糖尿病大鼠成模共23只；然后重新分組，N組(正常對照組，10只)不變，D組(糖尿病組，12只)，P組(普羅布考組，成模后給予普羅布考500mg/kg/d干預(yù)8周組，11只)，D組和P組大鼠繼續(xù)予高糖高脂飼料喂養(yǎng)8周；測定三組大鼠血脂、胰島素、糖化血紅蛋白、血糖、24小時(shí)尿微量白蛋白定量(UMA)、腎功能、腎臟肥大指數(shù)，腎皮質(zhì)丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽還原酶(GSH-PX)活性，應(yīng)用免疫組織

3、化學(xué)方法檢測裂隙膜nephrin的蛋白表達(dá)，RT-PCR方法檢測nephrinmRNA、podocinmRNA和CD2APmRNA的表達(dá)，同時(shí)在電子顯微鏡下觀察腎小球足細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變。所得數(shù)據(jù)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析。 結(jié)果：1.高糖高脂喂養(yǎng)加小劑量STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠血糖、血脂及HOMA-IR較普通飼料喂養(yǎng)組明顯增高(均P<0.05)，符合2型糖尿病發(fā)病特點(diǎn)。 2.糖尿病組大鼠腎皮質(zhì)SOD、GSH-PX活

4、性較正常對照組顯著降低(均P<0.05)，MDA含量較正常對照組顯著升高(P<0.05)；普羅布考組SOD、GSH-PX活性較糖尿病組升高(均P<0.05)，MDA含量較糖尿病組顯著下降(P<0.05)；糖尿病組和普羅布考組的腎臟肥大指數(shù)較正常對照組增大(均P<0.05)。 3.糖尿病組大鼠腎小球內(nèi)nephrin蛋白表達(dá)較正常對照組顯著降低(P<0.05)，nephrinmRNA、podocinmRNA和CD2APmRNA的表達(dá)

5、較正常對照組顯著降低(均P<0.05)；普羅布考干預(yù)后nephrin蛋白表達(dá)較糖尿病組增加(P<0.05)，nephrinmRNA、podocinmRNA和CD2AP的mRNA表達(dá)較糖尿病組增加(均P<0.05)。 4.糖尿病組腎小球足細(xì)胞足突嚴(yán)重融合，足突減少；普羅布考組足突融合嚴(yán)重程度介于正常對照組和糖尿病組。 結(jié)論：1.利用高糖高脂飲食喂養(yǎng)加小劑量STZ兩次注射方法成功制備了T2DM大鼠模型。 2.糖尿病時(shí)