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1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文抗卵巢癌相關(guān)抗原的抗體的研制和免疫分析方法的建立姓名:許楊申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):核醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:范振符20000501I醛弧積CAl25isanantigenicdeterminantrecognizedby0C125,elevatedintheserumofover80percentofpatientswithovariancarcinomaCAl25tumorassociatedantigenwaLsp
2、artiallypurifiedfromtheasciticfluidofapatientwithovarianadenocarcinomabyperchloricacidfractionation,gelchromatographyandAffi—gelbluechromatography,resultinginapurifiedsampleof11106CAl25unitpermilligramofprotein(1100foldp
3、urification)Westernnnblottinganalysisofthispurifiedantigenrevealedahighmolecularweightglycoproteincomplex(200KD)CAl25antigenisdistinctfromCAl99byAffi—gelbluechromatography,whichhadnoCAl99immunoreactionTheCAl25,partlypuri
4、fiedfromtheasciticfluid,hasbeenusedasantigenSpleencellsfromBALB/cmicewiththehighestantibodytiterswerefusedwithSP2/Omurinemyelomacellsby50percentofPEGAfterhundredsofscreeningandmanytimesofcloningandsubcloning,sixstablehyb
5、ridomaswereobtainedfrom8separatefusionEach罅the6hybridomswereinjectedintraperitoneallyinpristane—primedmiceEachoftheantibodywascharacterizedThetiterofthesixMcAbwereintherangeof08一lOxloTheiraffinitieswerevariedbeteween0111
6、09and50X109L/mol,andallofthemwereIgClsubclassWesternnnblotscreeningofthesemonoclonalantibodiesindicatedthatallofthemrecognizedhigh—molecular—weight(MW200KD)CAl25associatedantigen,revealedaratherbroadband,Theresultofantib
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