神經(jīng)生長因子介導(dǎo)心理應(yīng)激內(nèi)臟高敏感形成的機(jī)制研究.pdf

1、研究目的: 腸易激綜合征(irritable bowel syndrome,IBS)是常見的功能性胃腸病(functionalgastrointestinal disorders,FGIDs),目前認(rèn)為內(nèi)臟高敏感是IBS的重要病理生理機(jī)制之-。神經(jīng)生長因子(nerve growth factor,NGF)是一種由機(jī)體自身分泌的神經(jīng)內(nèi)分泌激素,它具有多種生物學(xué)效應(yīng),已廣泛應(yīng)用于臨床。研究結(jié)果表明,NGF是促發(fā)幼鼠母嬰分離應(yīng)激后內(nèi)臟

2、高敏感的重要介質(zhì)之一,據(jù)此我們推測NGF在成年大鼠應(yīng)激致內(nèi)臟高敏感過程中也發(fā)揮重要作用。而P2X3受體和TRPV1受體參與并調(diào)控外周與內(nèi)臟傷害性信息的傳遞,但它們?cè)趦?nèi)臟高敏感大鼠中的作用尚不十分明確。本研究采用腹腔注射NGF和/或避水應(yīng)激來了解NGF在大鼠內(nèi)臟高敏感形成中所起的作用以及P2X3受體和TRPV1受體在其中所起的作用。 研究方法： 以腹腔注射NGF和/或慢性避水(water avoidance,WA)應(yīng)激方法

3、建立內(nèi)臟高敏感大鼠模型,應(yīng)用電生理記錄儀記錄結(jié)直腸擴(kuò)張(colorectal distention,CRD)時(shí)大鼠腹壁肌電圖(electromyographic,EMG)的改變,并以EMG的曲線下面積反映內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)反射(visceromotor response,VMR)的強(qiáng)弱。以免疫熒光組織化學(xué)染色方法檢測大鼠背根神經(jīng)節(jié)(dorsal root ganglion,DRG)P2X3受體和TRPV1受體的改變,并計(jì)數(shù)P2X3受體和TRPV1

4、受體的百分?jǐn)?shù)。 結(jié)果: 各組大鼠造模前CRD時(shí)VMR無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。造模后N組和W組在各壓力CRD時(shí)的VMR值與C組相比均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);NW組在CRD壓力為80mmHg時(shí),與對(duì)照組相比VMR具有顯著差異(P=0.012);NW組在CRD壓力為20、40和60mmHg時(shí)的VMR值與C組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。熒光顯微鏡下可見L1、L2背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)分布有多個(gè)P2X3和TRPV1熒光

5、陽性細(xì)胞,為胞漿或胞膜表達(dá),分別呈綠色熒光和紅色熒光,以中、小型細(xì)胞免疫強(qiáng)度較大。陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)并經(jīng)雙因素方差分析,避水應(yīng)激可以上調(diào)P2X3受體表達(dá)(P=0.014)而與TRPV1受體表達(dá)無相關(guān)性(P=0.116);應(yīng)用NGF可以上調(diào)TRPV1受體表達(dá)(P=0.002)而與P2X3受體表達(dá)無相關(guān)性(P=0.514)。 結(jié)論: 應(yīng)用NGF后,可以加強(qiáng)避水應(yīng)激對(duì)大鼠內(nèi)臟高敏感的形成作用。在NGF介導(dǎo)的慢性避水應(yīng)激大鼠內(nèi)臟高敏感