納洛酮經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、納洛酮(Naloxone)是特異性阿片受體拮抗劑，它與嗎啡受體的親和力比嗎啡或β-內(nèi)啡肽大，能競爭性阻止并取代嗎啡樣物質(zhì)的作用。 它的應(yīng)用非常廣泛，能有效治療阿片類藥物濫用引起的各種癥狀，臨床上可用于治療酒精中毒、各型休克、鎮(zhèn)靜催眠藥中毒、阿片類藥物中毒、有機(jī)磷中毒、腦梗塞、心肺腦復(fù)蘇、缺氧缺血性腦病、心力衰竭等。由于納洛酮的首過效應(yīng)大，口服通常無效，目前主要采用皮下注射、肌內(nèi)注射或靜脈滴注給藥方式。 但由于納洛酮半衰期

2、短，作用持續(xù)時間僅45-90min，因此常常需要重復(fù)給藥，使用不便，制成經(jīng)皮給藥系統(tǒng)則可以增加生物利用度，減少給藥次數(shù)，提高病人用藥的順應(yīng)性及減少副作用。 本研究以增加納洛酮的經(jīng)皮滲透速率為基本思路，進(jìn)行了納洛酮經(jīng)皮給藥系統(tǒng)的研究。 主要內(nèi)容有以下五個方面： 一、藥物經(jīng)皮給藥系統(tǒng)開發(fā)的處方前研究工作； 二、以肉豆蔻酸異丙酯(IPM)-水-卵磷脂-正丙醇作為微乳的組成部分，進(jìn)行納洛酮微乳的經(jīng)皮給藥研究；

3、 三、采用醇質(zhì)體作為給藥載體，進(jìn)行納洛酮醇質(zhì)體的經(jīng)皮給藥研究； 四、在醇質(zhì)體的基礎(chǔ)上以羥丙甲纖維素(HPMC)為基質(zhì)，進(jìn)行納洛酮醇質(zhì)體凝膠復(fù)合物的經(jīng)皮給藥研究； 五、進(jìn)行納洛酮醇質(zhì)體凝膠劑在家兔體內(nèi)的藥動學(xué)研究。 在制劑開發(fā)的處方前研究工作中，首先建立了納洛酮的HPLC分析方法，以以下條件進(jìn)樣：色譜柱：DikmaC18(250mm×4.6mm，5μm)；流動相：0.1M磷酸鹽緩沖液(pH4.0)-甲醇-乙腈(

4、75:15:10)；檢測波長：240nm；流速：1.0ml/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：20μl。然后以濃度對峰面積作線性回歸，得到納洛酮標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y＝4766.00X+528.06，r=0.9993(n=6)。測得納洛酮的回收率在99.21％～102.72％之間，且日內(nèi)精密度為0.72％～2.13％，日間精密度為0.32％～6.82％； 其次，確立了藥物體外經(jīng)皮滲透研究的方法，采用改良的Franz單室擴(kuò)散池，用SD雄性

5、大鼠離體皮膚進(jìn)行體外經(jīng)皮滲透實驗，用HPLC法測定透過皮肽的納洛酮含量，求算穩(wěn)態(tài)透皮速率和在皮膚中的滯留量，并考察了促滲劑種類、藥物的含量對藥物體外經(jīng)皮滲透性能的影響，以及納洛酮經(jīng)皮給藥的可行性。 本研究結(jié)果表明這幾種促滲劑均有一定的促滲作用，其中以氮酮+丙二醇的效果最好，其穩(wěn)態(tài)滲透速率為10.34±1.61μg·h-1·cm-2。隨著藥物濃度的增加，納洛酮穩(wěn)態(tài)滲透速率也相應(yīng)增加，兩者有很好的線性關(guān)系[(Y=32.80X-1.0

6、5r=0.9881(n=3)]。納洛酮的累積滲透量也是隨著藥物濃度的增加而增加。 在微乳的經(jīng)皮給藥研究中，選用低純度的卵磷脂(PC≥70％)作為表面活性劑，肉豆蔻酸異丙酯為油相，正丙醇作助表面活性劑，制備了納洛酮—卵磷脂油包水型微乳，并探討微乳對藥物經(jīng)皮吸收的促進(jìn)作用。 用最佳處方制備的納洛酮微乳，其粒徑為45.10±21.13nm，包封率為81.74±2.60％。本實驗主要以透皮速率為指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)卵磷脂用量(％)(A)、

7、正丙醇用量(％)(B)和IPM用量(％)(C)這三個因素對微乳的經(jīng)皮吸收作用有較大的影響，呈顯著相關(guān)性。 還考察了常溫條件(25℃)下四元體系中組分變化與藥物微乳經(jīng)皮滲透行為的關(guān)系為Y=-206.74+2654.18A-0.32B-166.07C+116.67AB+558.33AC-483.33BC-9548.63A2+987.75B2-235.25C2+10385.42A3-1979.17B3+572.92C3r=0.9808

8、，(P＜0.0001)，在此基礎(chǔ)上采用效應(yīng)面優(yōu)化法，通過星點設(shè)計篩選了納洛酮微乳的最佳處方為：卵磷脂：29％，正丙醇：25％，IPM：35％。 按此最優(yōu)條件制備的納洛酮微乳穩(wěn)態(tài)滲透速率為4.33μg.h-1·cm-2，大大高于水溶液穩(wěn)態(tài)滲透速率0.20μg·h-1·cm-2。研究表明一定濃度的微乳對納洛酮的經(jīng)皮吸收具有促進(jìn)作用，是較好的經(jīng)皮給藥載體。 在醇質(zhì)體的經(jīng)皮給藥研究中，采用注入法制備納洛酮醇質(zhì)體，測定其粒徑和包封

9、率，考察醇濃度和藥物含量對滲透速率的影響，以及以醇質(zhì)體為載體的納洛酮經(jīng)皮給藥的可行性，并考察了不同的促滲劑對納洛酮醇質(zhì)體體外經(jīng)皮滲透性能的影響。實驗結(jié)果顯示，20％醇濃度的醇質(zhì)體的粒徑為152.61±29.63nm，脂質(zhì)體的粒徑為196.20±25.31nm，醇質(zhì)體的粒徑較脂質(zhì)體略小。20％醇濃度的醇質(zhì)體的包封率為82.50±1.84％，與脂質(zhì)體的包封率(84.00±2.23％)相當(dāng)。 隨著乙醇濃度的增加，納洛酮醇質(zhì)體的穩(wěn)態(tài)透皮

10、速率和皮膚中的滯留量也相應(yīng)地增加，含50％乙醇的納洛酮醇質(zhì)體的穩(wěn)態(tài)透皮速率達(dá)139.82±7.60μg·h-1·cm-2，是納洛酮水溶液的5.17倍，其在皮膚中的滯留量有775.22±36.22μg。相同醇濃度的醇質(zhì)體內(nèi)的藥物含量增加，藥物的滲透速率和在皮膚中的滯留量也相應(yīng)增加。二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亞砜、丙二醇、PEG400和氮酮(3％)+丙二醇(7％)這幾種促滲劑對納洛酮水溶液都有一定的促滲作用，增滲倍數(shù)從2.73～9.

11、57不等，其中氮酮(3％)+丙二醇(7％)的促滲作用最強(qiáng)。 促滲劑與醇質(zhì)體合用更能大大增加納洛酮經(jīng)皮滲透速率，滲透速率從26.35±2.56～96.75±5.70μg·h-1·cm-2，增滲倍數(shù)從14.17～54.97，其中氮酮(3％)+丙二醇(7％)作為促滲劑與醇質(zhì)體合用的增滲倍數(shù)大約為55，其促滲作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于兩者單獨使用時的促滲作用。 可見，一定濃度的醇質(zhì)體，再聯(lián)合適當(dāng)濃度的促滲劑，可以促進(jìn)藥物的滲透速率，增加藥物的

12、累積滲透量，而且醇質(zhì)體制備簡單，是一種安全有效的、能促進(jìn)藥物經(jīng)皮吸收的新型經(jīng)皮給藥載體。 在醇質(zhì)體凝膠劑的經(jīng)皮給藥研究中，在醇質(zhì)體的基礎(chǔ)上以不同濃度的羥丙甲纖維素(HPMC)為基質(zhì)，制備成半固體狀態(tài)的納洛酮醇質(zhì)體凝膠劑，用HPLC法測定透過皮膚的納洛酮含量，求算其穩(wěn)態(tài)透皮速率和皮膚中的藥物滯留量。 并考察不同濃度的羥丙甲纖維素(HPMC)以及納洛酮醇質(zhì)體凝膠劑與化學(xué)促滲劑聯(lián)合應(yīng)用對體外滲透速率的影響。研究結(jié)果顯示，適當(dāng)濃

13、度的HPMC作為納洛酮醇質(zhì)體的基質(zhì)時，能提高納洛酮的透皮速率，增加藥物在皮膚中的滯留量。 經(jīng)二甲基甲酰胺、丙二醇處理的實驗組，納洛酮的透皮速率沒有明顯改變，而經(jīng)二甲基亞砜、氮酮、氮酮+丙二醇處理的實驗組與對照組相比，納洛酮的透皮速率都有所提高，其中以二甲基亞砜的促滲效果為最好。控制納洛酮濃度為2mg/ml，HPMC為3％，醇質(zhì)體含醇量為30％，當(dāng)加入1％、3％、5％、9％的二甲基亞砜時，納洛酮的透皮速率分別為不含二甲基亞砜的醇質(zhì)

14、體的1.33、1.43、1.46、1.82倍。 在納洛酮醇質(zhì)體凝膠劑在家兔體內(nèi)的藥動學(xué)研究中，采用雙周期自身對照交叉試驗設(shè)計，以納洛酮注射劑為對照，按照色譜條件[色譜柱ZorbaxSB-C(150mm×2.1mm，5m)；柱溫：35℃；流動相：乙腈-2mM磷酸緩沖液(27：73)；流速：0.4ml·min-1；進(jìn)樣量：2μl]和質(zhì)譜條件[電噴霧離子化源(ESI)：正離子檢測；保護(hù)氣N2流速：10L·min-1；干燥氣溫度：350

15、℃；霧化氣壓力：300kPa；毛細(xì)管電壓：4000V；選擇性離子檢測(SIM)：納洛酮m/z328.10[M+H]+；碎片電壓：150V]，用HPLC-MS法測定不同時間的血藥濃度值，得到血藥濃度一時間曲線，獲得納洛酮醇質(zhì)體凝膠劑的主要藥動學(xué)參數(shù)，從而了解其藥代動力學(xué)特征。 納洛酮醇質(zhì)體凝膠劑經(jīng)皮給藥后藥代動力學(xué)特征為有滯后作用的一級吸收和一級消除單室模型，時滯為3.33±1.20h，一級吸收速度常數(shù)Ka為0.42±0.26h，