BRCA1-2及DBC2基因突變與華東地區(qū)早發(fā)非家族性乳腺癌發(fā)病關(guān)系的研究.pdf

1、[研究背景] 乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，它嚴(yán)重威脅女性健康。易感基因一直是乳腺癌研究的熱點(diǎn)之一，而BRCA1和BRCA2是迄今發(fā)現(xiàn)與乳腺癌發(fā)生最重要的易感基因，60％的乳腺癌患者體內(nèi)缺少DBC2基因，是非遺傳性乳腺癌相關(guān)的腫瘤抑制基因之一。 BRCA1基因是第一個被發(fā)現(xiàn)的家族性乳腺癌抑癌基因，位于人類第17號染色體上，由22個編碼外顯子和2個非編碼外顯子(外顯子1和4)構(gòu)成，全長約100kb，編碼一個由1863個

2、氨基酸組成的多功能區(qū)核蛋白。BRCA2基因全基因組DNA長約70kb，其中編碼區(qū)含有10987bp，定位于13q12-13，包含27個外顯子，編碼3418個氨基酸。DBC2屬于一種抑癌基因，定位于人類染色體8p21，全長20.5Kbp，又名Rhobtb2。 大量研究證明，乳腺癌是遺傳傾向最顯著的癌癥之一，5％～10％的乳腺癌來自家族遺傳，而90～95％為早發(fā)性乳腺癌。乳腺癌易感基因BRCA1、BRCA2的基因突變與乳腺癌高度相關(guān)

3、，并具有顯性遺傳特征。在家族性乳腺癌患者中，一旦此基因產(chǎn)生突變，其家族子代中所有成員皆有50％之機(jī)會帶有此突變基因。有家族性乳腺癌病史的女性，如果攜帶BRCA1基因突變，在40歲左右發(fā)生乳腺癌的概率約為20％。DBC2是一種非典型的Rho GTP酶，其正常功能是預(yù)防與腫瘤發(fā)生相關(guān)的異常細(xì)胞增殖。在乳癌細(xì)胞株中導(dǎo)入DBC2后可使其生長受抑，然而其在乳腺癌中發(fā)生自然突變者未能使腫瘤細(xì)胞生長受限。這些發(fā)現(xiàn)均表明DBC2在乳腺癌中起了腫瘤抑制基

4、因的作用。 目前，早發(fā)性乳腺癌(發(fā)病年齡低于40歲)越來越多見，特別是我國乳腺癌的發(fā)病年齡要比西方人群早10～15歲。本研究選擇華東地區(qū)早發(fā)非家族性乳腺癌患者和健康對照組人群作為研究對象，對BRCA1/2及DBC2基因的突變情況進(jìn)行研究，旨在探討其基因多態(tài)性和早發(fā)性乳腺癌的相關(guān)性。 [目的]本研究選擇華東地區(qū)早發(fā)非家族性乳腺癌患者和健康對照組人群作為研究對象，對BRCA1/2及DBC2基因的突變情況進(jìn)行研究，旨在探討其基

5、因多態(tài)性和早發(fā)性乳腺癌的相關(guān)性。 [方法]對象來自于華東地區(qū)的45例早發(fā)非家族性乳腺癌患者(發(fā)病年齡≤40歲)與30例正常人，進(jìn)行外周血基因組DNA提取。以45例早發(fā)性乳腺癌患者為實(shí)驗(yàn)組，對報道較多的BRCA1基因的第11外顯子的部分及第24外顯子、BRCA2基因第11外顯子的部分、DBC2基因第5外顯子的編碼序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行直接測序，分析上述基因突變情況與乳腺癌發(fā)病之間的關(guān)系。 [結(jié)果] (

6、1)45例患者和30例健康人中僅發(fā)現(xiàn)在位于第11外顯子處有一例錯義突變(A＞G)，其中雜合突變12例，純合子突變僅發(fā)現(xiàn)1例。三種基因型在兩組中的分布呈H-W平衡，具有群體代表性；實(shí)驗(yàn)組三種基因型頻率分別為AA型32例，GA型12例，GG型1例；但在對照組中三種基因型頻率分別為AA型30例，GA型0例，GG型0例；兩組比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。 (2)實(shí)驗(yàn)組中有8例DBC2基因第5外顯子的7776位堿基上發(fā)現(xiàn)了新的錯義突變

7、+7776C＞T(P．Leu288Phe)，突變率為17.78％，對照組中無此突變。經(jīng)Fisher確切概率法分析，第5外顯子7776位堿基突變率在早發(fā)非家族性乳腺癌患者中高于正常對照組(單側(cè)檢驗(yàn)P=0.0128，雙側(cè)檢驗(yàn)P=0.0371)。 (3)在所有實(shí)驗(yàn)及對照組中BRCA1基因的第24外顯子、BRCA2基因第11外顯子部分編碼序列未發(fā)現(xiàn)SNP位點(diǎn)，兩組突變率無差異性。 [結(jié)論] (1)45例患者和30例健康對

8、照組中僅發(fā)現(xiàn)在位于BRCA1基因的第11外顯子3142處有1例錯義突變(A＞G)。此點(diǎn)突變可能是上海市早發(fā)非家族性乳腺癌的突變位點(diǎn)；有可能作為上海早發(fā)非家族性乳腺癌高危基因突變位點(diǎn)，從而建立一個乳腺癌易感人群篩選的平臺，這將對社會和經(jīng)濟(jì)各個方面帶來巨大的受益，需要進(jìn)行進(jìn)一步研究確認(rèn)。 (2)乳腺癌患者DBC2基因第5外顯子+7776C＞T突變率高于正常對照組，可能是中國單純早發(fā)性乳腺癌特有的突變位點(diǎn)；有可能作為中國早發(fā)性乳腺癌高