雷洛昔芬對GH3細胞Seladin-1基因表達與細胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：探討選擇性雌激素受體拮抗劑雷洛昔芬對大鼠垂體瘤GH3細胞株seladin-1基因表達及其對腫瘤細胞增殖和凋亡的影響,分析seladin-1基因的功能及其在垂體瘤發(fā)生和發(fā)展中的調(diào)控機制,進一步為垂體腺瘤的藥物干預,以seladin-1為靶點的基因治療和藥物治療提供試驗依據(jù)。方法：大鼠垂體瘤GH3細胞常規(guī)在37℃、5%CO2、100%濕度的孵箱中培養(yǎng),以不同濃度(0.1nmol/L、1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L

2、、1000nmoi/L)的雷洛昔芬作用于大鼠垂體瘤GH3細胞,培養(yǎng)48小時后檢測雷洛昔芬的作用效果；以western blot檢測seladin-1基因在不同濃度藥物下蛋白表達、熒光定量RT-PCR檢測seladin-1基因在不同濃度藥物下seladin-1mRNA表達、Cell Counting kits-8(CCK-8)試劑盒檢測不同濃度藥物對腫瘤細胞增殖的影響和TUNEL試劑盒檢測不同濃度藥物對大鼠垂體瘤GH3細胞凋亡的不同影響。

3、結(jié)果：1.雷洛昔芬在10nmol/L-1000nmol/L的濃度范圍抑制seladin-1mRNA表達(P<；0.05),在10nmol/L~100nmol/L, GH3細胞seladin-1mRNA表達下降最顯著,0.1nmol/L、1nmol/L組與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>；0.05)。2.雷洛昔芬在所有實驗組均抑制seladin-1基因蛋白表達(P<；0.05),在0.1nmol/L、1nmol/L、10nmo

4、l/L、100nmol/L組表現(xiàn)為,隨著藥物濃度的升高,GH3細胞seladin-1蛋白表達呈現(xiàn)下降趨勢(P<；0.05),而在100nmol/L、1000nmol/L表現(xiàn)為,隨著藥物濃度的升高,GH3細胞seladin-1蛋白表達呈上升趨勢(P<；0.05),在100nmol/L實驗組,GH3細胞seladin-1蛋白表達下降最為明顯。3.雷洛昔芬在10~1000nmol/L實驗組能夠抑制GH3細胞生長(P<；0.05),

5、在10~100nmol/L實驗組抑制最顯著,0.1~1nmol/L實驗組未見明顯抑制,與陰性對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>；0.05)4TUNEL試劑盒檢測雷洛昔芬在10~1000nmol/L濃度對大鼠垂體瘤GH3有效誘導細胞凋亡(P<；0.05)。結(jié)論：1.雷洛昔芬能夠抑制大鼠垂體瘤GH3細胞株seladin-1mRNA和蛋白的表達,并且在10~1000nmol/L濃度范圍均受到抑制,抑制程度二者表現(xiàn)有一致性；2.雷洛昔芬能