TSLP、IL-17在小鼠念珠菌性陰道炎發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、[目的]
　　 1.觀察雌激素、孕激素在小鼠念珠菌性陰道炎模型構(gòu)建中的作用。
　　 2.探討胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(TSLP)、IL-17在小鼠念珠菌性陰道炎發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 [方法]
　　 1.104只8～10周齡雌性Balb/c小鼠分為空白對照組、實驗對照組、雌激素組、孕激素組、雌激素+孕激素組。在陰道接種10μl白念珠菌(Ca)懸液(5×104個孢子)前72h皮下注射不同劑量雌二醇和(或)黃

2、體酮，接種后3 d、7 d、14 d、21 d各組隨機(jī)取2只小鼠進(jìn)行陰道菌落計數(shù)、組織病理檢查及陰道黏膜厚度測量。PAS染色觀察菌絲浸潤范圍，HE染色觀察炎癥反應(yīng)程度。
　　 2.80只Balb/c雌性小鼠分為空白對照組、實驗對照組、雌激素組、孕激素組、雌激素+孕激素組，空白及實驗對照組后腿皮下注射滅菌大豆油0.1 ml，其余實驗組分別給予苯甲酸雌二醇0.05 mg、黃體酮3 mg、雌二醇0.05 mg+黃體酮3 mg。在陰道接

3、種后3 d、7 d、14 d、21 d分別取陰道組織，HE、PAS染色觀察黏膜感染情況，real-time PCR、免疫熒光雙標(biāo)+激光共焦顯微鏡觀察TSLP、IL-17 mRNA和蛋白表達(dá)。
　　 [結(jié)果]
　　 1.雌激素、孕激素在小鼠念珠菌性陰道炎模型構(gòu)建中的作用①各組菌落計數(shù)在接種后3 d最高，7 d明顯減少，21 d幾乎為零；與EOPO組比較，雌孕激素聯(lián)合組3 d、7 d菌落計數(shù)最高(P<0.05)，其次為單用雌

4、激素組(P<0.05)，但單用孕激素組無明顯變化(P>0.05)。②單用雌激素組的陰道黏膜炎癥反應(yīng)比單用孕激素組出現(xiàn)早、程度重；雌孕聯(lián)合組陰道感染程度較對應(yīng)雌激素組輕，但重于對應(yīng)孕激素組。⑨雌激素組陰道黏膜厚度與空白對照組及實驗對照組比較無明顯變化，孕激素組明顯變薄，而雌孕聯(lián)合組變化介于雌激素組與孕激素組之間。④大劑量孕激素(6 mg/w)可使小鼠陰道角化層及顆粒層細(xì)胞變性，糖原和黏蛋白沉積，但聯(lián)用雌激素不發(fā)生類似變化。
　　

5、2.TSLP、IL-17在小鼠念珠菌性陰道炎發(fā)病機(jī)制中的作用①雌激素和(或)孕激素組TSLP、IL-17免疫熒光呈高表達(dá)，主要分布在陰道黏膜感染區(qū)域上皮細(xì)胞胞質(zhì)、黏膜下細(xì)胞和血管壁中，而空白對照組和EOPO組僅有基底膜帶、黏膜下細(xì)胞和血管壁少量表達(dá)。②與對照組相比，雌激素組及雌孕聯(lián)合組TSLP mRNA水平在3 d時有不同程度升高，7 d時升高最為明顯，隨后下降，而孕激素組升高不明顯。③雌激素組和孕激素組IL-17 mRNA表達(dá)在接種后

6、7 d開始上調(diào)，21 d達(dá)到高峰；雌孕聯(lián)合組在接種后3 d表達(dá)增加，14 d達(dá)到高峰。④雌激素組中TSLP與IL-17呈負(fù)相關(guān)(r=-0.941，P<0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 1.單用雌激素可有效誘導(dǎo)小鼠陰道Ca感染，而聯(lián)用孕激素可抑制菌絲的粘附、浸潤。
　　 2.單用雌激素對小鼠陰道黏膜厚度無明顯影響，但單用孕激素可使陰道黏膜變薄。
　　 3.單用大劑量孕激素(6 mg/w)可使小鼠陰道上皮細(xì)