彗星試驗(yàn)方法研究和在醫(yī)藥安全評(píng)價(jià)上的應(yīng)用.pdf

1、彗星試驗(yàn)(Comet assay)又稱單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)(SCGE)，是一種用于測(cè)定、研究單個(gè)細(xì)胞DNA斷裂的新電泳技術(shù)。由于其具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏、樣品量少、無(wú)需放射性標(biāo)記等特點(diǎn)，有極高的使用價(jià)值。其用于檢測(cè)遺傳毒性的敏感性與Ames試驗(yàn)相當(dāng)，因此應(yīng)用前景十分廣泛。本文在建立該方法的基礎(chǔ)上，將此方法擴(kuò)展應(yīng)用到醫(yī)藥安全性評(píng)價(jià)中。本研究依據(jù)’lice等(2000年)建立的國(guó)際性試驗(yàn)指導(dǎo)原則，采用醫(yī)藥人參皂苷Rg3凍干粉針為受試物，設(shè)3個(gè)試

2、驗(yàn)劑量組，分別為140、70、35μg/ml、陰性對(duì)照組和以甲基磺酸甲酯(MMS)為陽(yáng)性對(duì)照物的2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照劑量組，分別為1.1×10<'-3>、11×10<'-3>μg/ml，處理CHL細(xì)胞2h后，對(duì)CHL細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)。從細(xì)胞的彗星圖和試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析可以看出，陰性對(duì)照組和人參皂苷Rg3凍干粉針各試驗(yàn)劑量組的受試細(xì)胞DNA均無(wú)明顯損傷。陽(yáng)性對(duì)照組細(xì)胞出現(xiàn)明顯彗星，并隨著MMS濃度的增大，彗星尾長(zhǎng)明顯增長(zhǎng)，說(shuō)明MMS濃度越高，