低氧誘導大鼠腦和垂體CRH,CRHR1和CRHR2基因表達模式.pdf

1、背景和目的：
　　 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(Corticotropin releasing factor,CRF or CRH)介導下丘腦-垂體-腎上腺軸(hypothalamus-pituitary-adrenal axis,HPA axis)對外界應(yīng)激進行應(yīng)答反應(yīng)。下丘腦分泌CRH到垂體門脈系統(tǒng),作用于腺垂體與其特定受體結(jié)合并促進垂體處的促皮質(zhì)激素細胞合成釋放促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenocorticotrophic ho

2、rmone,ACTH),而ACTH促進腎上腺合成分泌糖皮質(zhì)激素,引起應(yīng)激相關(guān)的生理反應(yīng)。CRH 通過與CRHR1(Corticotropin-releasing factorreceptor 1)和CRHR2(Corticotropin-releasing factor receptor 2)兩個主要的受體結(jié)合發(fā)揮作用。本實驗室利用低氣壓艙模擬高原低氧,從整體、細胞和亞細胞水平,系統(tǒng)地研究了高原低氧應(yīng)激與適應(yīng)及其作用機理;系統(tǒng)地研究了低

3、氧激活HPA軸在保持機體腦-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、調(diào)節(jié)生理功能方面的作用。本實驗目的是研究低氧下不同腦區(qū)CRH及其CRHR1和CRHR2受體基因的變化模式.
　　 實驗設(shè)計和方法：利用模擬高原低氧的方法,研究了低氧2km(16.0％02,79.97kPa),5km(10.8％02,54.02kPa)和7km(7.8％02,41.83kPa)8小時,采用實時定量PCR對大鼠不同腦區(qū)、垂體CRH,CRHR1和CRHR2基因的表

4、達的影響,以及重要腦區(qū)和垂體低氧誘導因子HIF-1a的基因表達.利用生物信息學分析了CRHR1和CRHR2啟動子區(qū)轉(zhuǎn)錄因子AP-1、P53、GR、NF-κB和HIF-1的結(jié)合位點以及可能的HIF-1轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)模式。
　　 實驗結(jié)果：
　　 1.不同海拔高度低氧(2km、5km和7km)誘導大鼠皮層、海馬和PVN區(qū)的CRHmRNA水平顯著升高;杏仁核CRHmRNA表達僅在5km和7km下顯著升高。低氧誘導的CRHmRNA基因

5、表達與低氧強度呈正相關(guān)。
　　 2.不同海拔高度低氧2km、5km、7km誘導大鼠皮層、海馬、PVN、藍斑和垂體CRHR1mRNA水平顯著升高;杏仁核CRHR1mRNA表達僅在5km和7km下顯著升高。CRHR1mRNA基因的表達量與低氧強度呈正相關(guān)。
　　 3.在皮層和杏仁核,5km、7km低氧顯著降低CRHR2mRNA的表達;而海馬CRHR2mRNA無變化;在PVN區(qū),不同程度低氧(2km、5km、7km)均可以誘導

6、CRHR2mRNA顯著升高;藍斑區(qū),低氧2km和5km誘導CRHR2mRNA水平顯著升高,而在低氧7km時沒有發(fā)現(xiàn)顯著變化;在垂體,僅發(fā)現(xiàn)低氧7km明顯降低CRHR2mRNA。皮層、杏仁核CRHR2基因表達與低氧強度呈負相關(guān);海馬區(qū)沒有相關(guān)性;PVN區(qū)呈正相關(guān)。
　　 4.在皮層、海馬和垂體,低氧5km、7km顯著升高HIF-1amRNA基因表達,其表達量與低氧強度呈正相關(guān)。
　　 小結(jié)：
　　 低氧以強度依賴性